血清成分分析.doc

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1、血清成分分析作者：冯晓帆（温州大学生命与环境科学学院，浙江温州，325000）摘要：本次实验通过邻苯二甲醛法对血清中的胆固醇进行了定量测定；通过盐析、透析与浓缩首先把血清蛋白分成血清清蛋白与γ-球蛋白，再通过醋酸纤维薄膜电泳发对其进行了鉴定，发现血清中含有清蛋白、α1、α2、β、γ五种蛋白；我们还对血清成分之一的谷丙转氨酶分别对其活性和活力进行了鉴定与测定，让我们对血清的成分有比较深的了解。关键词：血清、谷丙转氨酶、胆固醇、蛋白Thebloodserumingredientanalyzestheaut

2、hor:FengXiaofan(WenzhouUniversitylifeandenvironmentalscienceinstitute,ZhejiangWenzhou,325000)abstract:Thisexperimenthascarriedonthequantitativedeterminationthroughtheneighbouringphenyldimethanallawtobloodserum'scholesterol;Throughthesaltingout,thedialys

3、isandtheconcentrationfirstdivideintotheserumalbuminthebloodserumalbumenwithGamma-theglobulin,sentagainthroughtheacetatefilmelectrophoresistoithascarriedontheappraisal,discoveredthatinthebloodserumincludedthealbumen,α1,α2,Beta,Gammafivekindofproteins;Wea

4、lsotoofGubloodserumingredientsBingthetransaminaseseparatelyhascarriedontheappraisalandthedeterminationtoitsactivenessandthevigor,letsushavethequitedeepunderstandingtobloodserum'singredient.keyword:Bloodserum,valleythirdtransaminase,cholesterol,protein前言

5、：血液是凝固析出的淡黄色透明液体。血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。它能提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。它也能提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素、类固醇激素等，能提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁（结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用）；它还能提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤与对培养中的细胞起到某些保护作用等等。总而言之，血清在多方面都起着各种各样的

6、作用，因此对血清成分的了解与分析就显得尤为重要，是实在必要的。实验材料：　⑴、供试材料①、兔子免疫的血清、兔子未免疫的血清、肝脏②、邻苯二甲醛试剂：称取邻苯二甲醛（A.R.）50mg，以无水乙醇（A.R.）溶解并稀释到50mL，冷藏，有效期1个半月。③、标准胆固醇应用液（0.1mg/mL）：准确称取胆固醇（A.R.）100mg以醋酸定容至1000mL。④、PBS、(NH4)2SO4溶液、双缩脲试剂、酪蛋白、蔗糖、BaCl2溶液⑤、1%谷氨酸溶液（1%KOH溶液中和）1%丙酮酸钠溶液（用1%KOH溶液中

7、和）0.1%标准谷氨酸溶液0.1%标准丙氨酸溶液⑥、酚的饱和水溶液将2份酚和2份水（按重量计算）混合后，放入分液漏斗中，振荡。静止24h以后分层，将下部酚层放入瓶中备用。新配制的酚展层剂可以反复使用1周。⑦、0.1%KHCO3溶液0.025%一溴乙酸溶液（用1%KOH中和）2%乙酸溶液0.1%水合茚三酮的正丁醇溶液1%KOH溶液9%NaCl溶液海砂0.4mol/LNaOH溶液⑧、1/15mol/LpH=7.4的磷酸缓冲液取1/15mol/L磷酸氢二钠（称取Na2HPO49.47g或Na2HPO4·12

8、H2O23.87g，溶于蒸馏水中定容至1000mL）825mL；1/15mol/L磷酸二氢钾（称取KH2PO49.078g溶于蒸馏水中定容1000mL）175mL混合。⑨、1、1mmol/L2，4-二硝基苯肼称取2，4-二硝基苯肼20mg，溶解于10mL浓盐酸中，以蒸馏水定容至100mL。2、2μmol/mL丙酮酸钠标准液精确称取丙酮酸钠22mg，加磷酸缓冲液溶解后，定容至100mL。临用前配制。3、GPT基质液称α-酮戊二酸，29.2mg（2mmol/