霉菌毒素试剂盒操作流程图.doc

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1、黄曲霉毒素B1操作流程示意图1234567891011121.每孔加入250ul洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破）；1234567891011122.1-6号孔分别按次序由小到大加入浓度为0--2ppb标准品溶液各50ul，剩余孔从7号开始分别加入要测定的样品的稀释液；然后从1号开始的所有孔分别加入50ul稀释后的酶标抗原溶液，加盖后放入37℃培养箱，进行30分钟温育；3.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul洗涤液，洗板5次；1234567891011121234567891011124.5次洗板

2、后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔先加入50ul底物a，然后所有孔再加入50ul底物b，加盖后放入37℃培养箱，进行15分钟温育；123456789101112显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到1-6号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。），样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图1234567891011125.显色反应完成后，在每个孔中加入50ul的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上450nm波长的酶标仪读取吸光度值。

3、呕吐毒素试剂盒操作流程示意图1234567891011121.每孔加入250ul洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破）；1234567891011122.1-6号孔分别按次序由小到大加入浓度为0--360ppb标准品溶液各50ul，剩余孔从7号开始分别加入稀释好的样品液；然后从1号开始的所有孔分别加入50ul酶标记物溶液，最后在每孔加入50ul抗试剂，加盖后放入37℃培养箱，进行20分钟温育；3.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul洗涤液，洗板5次；12345678910111212345678910

4、11124.5次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔先加入50ul底物液，然后所有孔再加入50ul显色液，加盖后放入37℃培养箱，进行15分钟温育；123456789101112显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到1-6号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。），样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图1234567891011125.显色反应完成后，在每个孔中加入50ul的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上450nm波长的

5、酶标仪读取吸光度值。玉米赤霉烯酮毒素试剂盒操作流程示意图1234567891011121.每孔加入250ul洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破）；1234567891011122.1-6号孔分别按次序由小到大加入浓度为0—2.4ppb标准品溶液各50ul，剩余孔从7号开始分别加入稀释好的样品液；然后从1号开始的所有孔分别加入50ul酶标记物溶液，最后在每孔加入50ul抗试剂，加盖后放入37℃培养箱，进行20分钟温育；3.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul洗涤液，洗板5次；1234567891011

6、121234567891011124.5次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔先加入50ul底物液，然后所有孔再加入50ul显色液，加盖后放入37℃培养箱，进行15分钟温育；123456789101112显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到1-6号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。），样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出无规律的不同程度的蓝色。示意图如下：显色示意图1234567891011125.显色反应完成后，在每个孔中加入50ul的终止液，蓝色变成黄色

7、，混匀后上450nm波长的酶标仪读取吸光度值。赭曲霉毒素A试剂盒操作流程示意图1234567891011121.每孔加入250ul洗涤工作液，预洗板两次，拍干（拍干后残留的气泡可用吸头戳破）；1234567891011122.1-5号孔分别按次序由小到大加入浓度为0—8.1ppb标准品溶液各50ul，剩余孔从6号开始分别加入稀释好的样品液；然后从1号开始的所有孔均加入50ul赭曲霉毒素A抗体，加盖后放入37℃培养箱，进行30分钟温育；1234567891011123.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul洗涤液，洗板5次；1

8、234567891011124.5次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔均加入100ul酶标二抗，加盖后放入37℃培养箱，进行30分钟温育；1234567891011125