根系表面积及其活性的测定方法.doc

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1、根系表面积的测定测定根系表面积的方法很多，可归纳为直接测量法和间接测量法两类。直接测量法是测定大量的单根的平均直径以及测量每个样品的总根长，按s=∏RL（R：直径；L：总长）公式来估算根系表面积。此法工作量大，精度差。间接测量法有染色液蘸根法、重量法、滴定法和叶面积仪法。重量法是将洗净风干根浸入浓硝酸钙溶液中10秒钟后捞出，由浸根前后硝酸钙溶液的重量差做为相对值来表示根系的表面积。滴定法是将洗净风干的根系浸入3mol.L-1的HCl溶液中（500ml）15秒钟后捞出，将根悬吊放置5分钟，除去多余的盐酸后再浸入蒸馏水（250ml）漂洗10分钟以上，取浸

2、过根系的盐酸和水各100ml，用0.3mol.L-1的NaOH进行滴定（以酚酞为指示剂），以NaOH的滴定值（ml单位）相对表示根系的面积。如果选用完整而已知面积的根系，即可作出标准曲线进行绝对测定。叶面积仪法是将洗净吸干附着水的根系，浸入到0.2mmol.L-1的甲烯蓝溶液中1.5分钟，捞出用吸水纸吸干附着溶液，将根散铺在透明塑料薄膜上成长条形注意不能重叠，再把多余的塑料薄膜折盖并夹住根系，用光电叶面积仪（如用L1-3000型叶面积仪）象测叶面积一样测定，所的测定值再乘以∏值（假定根为圆拄形），即为根系总面积。据此认为此法对于根直径小于1mm是误差

3、较大。如果根系不透明时不必染色。应用比较普遍的是染色液蘸根法，这种方法不仅可以测定总吸收面积还可以区分活跃吸收面积。1．方法原理根据沙比宁等的理论，认为植物根系对物质的吸收最初具有吸附的特性，并假定此时被吸附物质是以单分子层形式均匀的覆盖在根系表面。之后在根系的活跃部分把原来吸附着的物质解吸到细胞中去，根系又可以继续吸附。因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。一般用甲烯蓝作为被吸附物质，其被吸附的数量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确的测出。据沙比宁测定1mg甲烯蓝成单分子层时可覆盖1.1平方米的面积，据此可以求出根系的总吸收面积。

4、当根系在甲烯蓝溶液中已经达到吸附饱和而仍留在溶液中时，根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去，因而可以继续吸附甲烯蓝。从后一个吸附量可求出活跃吸收面积，可作为根系活力的指标。2．仪器药品分光光度计；小烧杯；量筒（50ml）;移液管；容量瓶；试管；试管架；吸水纸；剪刀；镊子；0.0002mol.L-1甲烯蓝溶液：75mg甲烯蓝溶解定容至1000ml(0.075mg.ml-1)；0.01mg.ml-1甲烯蓝溶液：取0.0002mol.L-1的甲烯蓝溶液13.4ml加水定容至100ml。3．测定方法（1）绘制甲烯蓝溶液标准曲线。取7支试管编号，按下

5、表配成甲烯蓝系列标准液：试管号12345670.01mg.ml-1甲烯蓝液加入量（ml）0123456加蒸馏水量（ml）10987654甲烯蓝液浓度（mg.ml-1）00.0010.0020.0030.0040.0050.006把各管混匀后，用分光光度计在660nm下测定光密度并绘制浓度光密度曲线。（2）将根系洗净用吸水纸吸干表面附着水，将根浸在盛水的量筒中测定根系的体积（或用根系体积测定装置）。（3）把0.0002mol.L-1的甲烯蓝溶液，分别倒入3个编号的烧杯中，每杯中溶液的量约10倍于根系体积，准确记下每杯的溶液用量。（4）从量筒中取出根系，

6、用吸水纸把水吸干，注意勿伤根系。然后放入第一个盛有甲烯蓝溶液的小烧杯中，浸1.5分钟后立即取出，使根系上多余的甲烯蓝溶液流回到原烧杯中去。再放入第二个小烧杯中浸1.5分钟，取出后同样使根系上多余的甲烯蓝溶液流回到原烧杯中去。最后再浸入第三个小烧杯中1.5分钟，取出后使根系上多余液体流回到烧杯中去。（5）从上述三个烧杯中各取出1ml甲烯蓝溶液，分别加入三个试管各稀释1-10倍，摇匀后在660nm下测定光密度，并在标准曲线上查出相应的浓度（mg.ml-1）。再乘以稀释倍数，即为浸根后溶液的甲烯蓝浓度，如浸根后溶液浓度降低很多，也可不经稀释直接测定光密度。

7、（6）结果计算总吸收面积（m2）=【（C0-C1）×V1＋（C0-C2）×V2】×1.1活跃吸收面积（m2）=【（C0-C3）×V3】×1.1活跃吸收面积（%）=活跃吸收面积（m2）/总吸收面积（m2）×100比表面积=根系总吸收面积（cm2）/根的体积（cm3）式中：C0---------------甲烯蓝溶液原浓度（0.075mg.ml-1）C1、C2、C3---分别为1、2、3烧杯浸根后溶液的浓度（mg.ml-1）V1、V2、V3----分别为1、2、3烧杯中加入的0.0002mol.L-1甲烯蓝溶液的体积（ml）。根系氧化还原力的测定根系氧化

8、还原力与呼吸作用有着密切的关系，它是根系活力的重要表现。α-萘胺能被根系所氧化，当根系的氧化力增大时，有氧呼