生物技术药物的免疫毒性和免疫原性课件.ppt

《生物技术药物的免疫毒性和免疫原性课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、生物技术药物的免疫毒性和免疫原性研究生物技术药物生物技术药物包括体内诊断、治疗与预防用途；来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞蛋白质、多肽及其衍生物、核酸如细胞因子、生长因子、融合蛋白、酶、激素、单抗、载体等特殊性结构、生产工艺、保存条件、同源性、作用靶点明确等固有的特点免疫毒性/免疫原性免疫毒性是指受试品引起免疫抑制或增强、过敏反应或自身免疫反应，可能与药理活性相关（如抗排斥药物）或不相关（如部分抗肿瘤药物）。免疫原性指药物刺激机体形成特异性抗体或致敏淋巴细胞的性质。研究意义意义重大：如免疫抑制，感染↑，肿瘤↑免疫增强，放大自身免疫反应或过敏反应。免疫原性，是药物

2、本身具有的性质，有免疫原性不一定导致毒性，但可以影响对药物毒性、毒代或药效的客观评价。但在规范及指导原则方面，缺乏共识，实验方法也不统一免疫毒性研究内容一常规的免疫毒性指标包括：白细胞总数及其分类计数球蛋白和白/球比值补体水平淋巴器官/组织的大体解剖胸腺和脾脏的器官重量免疫病理：胸腺、脾脏、引流淋巴组织免疫毒性研究内容二额外的免疫毒性试验（additionalstudies），如(1)常规免疫毒性检测结果提示免疫毒性，感染↑(2)受试品的结构，与已知免疫调节剂相似(3)药代动力学结果:原型药或代谢产物在免疫组织蓄积(4)适应症:如用于抗HIV药物(5)药理作用：常对免疫系

3、统有影响常规的免疫毒性检测结果—引流淋巴组织检查图　猴经口免疫HIV-BPV假病毒后回肠粘膜下集合淋巴小结ＡＢＡ：对照组，Ｂ：高剂量组常规的免疫毒性检测—免疫抑制/增强全血细胞变化、白细胞变化或淋巴细胞变化等。免疫器官重量改变或组织学检查显示相关器官或组织细胞密度变化血清免疫球蛋白变化用药组感染发生率升高用药组肿瘤发生率增多(除遗传毒性、激素效应或肝酶诱导外)额外的免疫毒性试验内容免疫功能检测如T细胞依赖的抗体反应、NK细胞活性、CTL活性、细胞因子表达、巨噬细胞/中性粒细胞功能、皮肤超敏反应、宿主抵抗力研究）免疫表型检测依据免疫学理论和具体靶分子种类额外的免疫毒性试验方

4、案增设卫星组、增加免疫学指标或改变给药方案等。发育免疫毒性：在成年动物中发现免疫抑制作用后，需要评价发育免疫毒性作用，如观察母代暴露于药物后仔代的淋巴系统、血液系统、细胞因子等，两种以上功能检测等。不仅是免疫抑制！常规阶梯或分层或标准试验组合不一定合理，需个体化额外的免疫毒性试验方法免疫功能检测Macrophage/Neutrophil荧光标记的胶珠观察phagocytosis等NK反映天然免疫功能TDARSRBCor钥孔血蓝蛋白(KLH），用ELISA等CTL51Cr释放法，ELISPOT法CytokinesELISA法及胞内细胞因子检测额外的免疫毒性试验方法免疫功能检

5、测hypersensitivity目前预测IV型变态反应Buehler试验、豚鼠最大化试验（GPMT）、小鼠耳肿胀试验、小鼠局部淋巴结试验(LLNA)autoimmunityPLNA（报告抗原TNP-Ficoll、TNP-Ovalbumin）hostresistance抗感染或抗肿瘤发生（整体，必要时）注：GPMT与人一致性约70%，LLNA约72%额外的免疫毒性试验方法免疫表型检测常用流式细胞仪检测，检测表达水平和比例SurfacemarkersIg+PanBcellsThy1.2+orCD3+PanTcells、CD4+CD8-THelper/delayed-type

6、hypersensitivitycellsCD8+CD4-TSuppressor-cytotoxiccellsCD8+CD4+ImmatureTcells免疫功能检测—分泌IFNγ细胞图　　猴经口免疫HIV-BPV假病毒后外周血p24特异性的分泌IFN－γ的淋巴细胞数量免疫细胞表型检测—CD22阳性比例图食蟹猴静脉注射SM03嵌合抗体后CD22标记阳性细胞率的变化CD22阳性细胞比例（%）免疫细胞表型检测—CD4/CD8比例CD4/CD8比例图猕猴iv4周LHRHA-PE38后外周血CD4/CD8比例免疫毒性试验结果分析统计学意义与生物学意义（尤其单一指标）变化程度与剂量

7、/暴露关系与拟用临床剂量的关系疗程关系涉及动物种属数量和受影响的终点可能继发于其他因素(e.g.,stress,）可能的细胞靶点和（或）作用机制引起这些变化的剂量与产生其他毒性的剂量关系可逆性免疫毒性靶器官的分析线索靶分子在免疫器官或组织的分布受试品或其代谢产物的分布相关指标的变化—常规免疫指标、细胞因子变化等。免疫毒性机制推测受体或药靶直接引起的毒性反应（on-target)—如干扰素引起骨髓抑制受体或药靶介导的间接毒性反应—如rhIL-12能诱导干扰素的分泌非特异机制—如rhTNK-tPA引起肝细胞剂量依赖性的脂肪变性。免