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1、感染.炎症.修复2008年9月第9卷第3期·研究报告·猪血纤维连接蛋白在大鼠烧伤创面愈合中的作用吴学军1 王 斌1 刘 栋2 刘兴尧1 章静波31.郑州德福恩生物技术有限公司,河南 郑州 450001;2.郑州大学第一附属医院肾内科,河南 郑州 450052;3.中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所,北京 100005) 纤维连接蛋白(FN)广泛存在于动物组织和组织液中,参与细胞的黏附、增殖、迁移和胚胎发育,也参与许多病理过程,如伤口愈合、炎症、纤维变性以及肿瘤的生成与转移。由于FN具有多种生物活性,所以国内外对基础研究和应用研究是都十分关注的领域。但人血资源的缺乏和昂贵限制了
2、FN的广泛应用。为了探索动物血FN能否作为有效的治疗剂,我们观察了猪血FN对大鼠烧伤创面愈合的效果,报告如下。1 材料和方法1.1 动物分组及处理 实验用SD大鼠36只,体重(250.4±6.1)g,雌雄各半,购自郑州大学医学院实验动物中心。随机分为3组:FN组、祛腐生肌散组和对照组,每组12只。实验前1d背部脱毛,用自动控温的圆形电烙铁于大鼠背部制备面积约6cm²的深Ⅱ度烧伤创面(80℃,10s)。各组于伤后2h开始创面给药。治疗组每天用含猪血浆FN(0.5mg/ml)的制剂(郑州德福恩生物技术有限公司,批号20061226)涂擦,每日1次,每次1ml,无菌敷料包扎;祛腐生肌散组外涂祛
3、腐生肌散(滨州蓝海中医药科技研究中心生产,批号20070309),无菌敷料包扎,每日换药1次;对照组用无菌敷料包扎,创面不给药,每日换药1次。1.2 观察指标1.2.1 创面愈合率 按Nagelschmidt等[1]的方法观察创面愈合情况,按下列公式计算创面愈合率:愈合率=(原始创面面积—未愈合创面面积)/原始创面面积×100%。1.2.2 组织中蛋白质、DNA以及羟脯氨酸含量测定 伤后7d、14d分别取创面组织匀浆,分别采用Bradford法和Hoechest33258染料荧光法检测组织中蛋白质、DNA以及羟脯氨酸含量。1.3 统计学分析 用SPSS10.0统计软件,各组数据均以x±s
4、表示,采用χ²检验、方差分析及t检验,P<0.05为差异有显著性。2 结 果2.1 创面一般情况 3组动物于模型建立之后1~3d,均表现为创面明显红肿,渗出液较多。FN组于第4日开始渗出减少,红肿消退;第8日可见肉芽组织开始生长。祛腐生肌散组发生上述变化的时间分别为伤后6d和12d,而对照组发生上述变化的时间分别为10和14d。与祛腐生肌散、对照组比较,FN组炎症反应轻,创周炎症消退快。2.2 创面愈合时间 FN组、祛腐生肌散组创面愈合时间较对照组明显缩短(P<0.01);且FN组较祛腐生肌散组明显缩短(P<0.01)。见表1。2.3 创面愈合率 伤后各时间点FN组和祛腐生肌散组的创面愈
5、合率均明显高于对照组(P<0.01),FN组较祛腐生肌散组创面愈合率明显升高(P<0.01)。见表1。表1 两组动物创面愈合时间和创面率的比较（x±s）组别动物数（只）创面愈合时间（d）创面愈合率（%）伤后7d伤后14d伤后21dFN组1219.21±2.5058±22*^87±0.13*^96±3*^祛腐生肌组1223.91±2.3529±13*61±0.12*81±21*对照组1226.33±3.2419±632±0.2066±11注：与对照组比较：*P<0.01,与祛腐生肌散组比较：^P<0.01 注:与对照组比较:*P<0.01;与祛腐生肌散组比较:△P<0.012.4 羟脯氨
6、酸、总蛋白质和DNA含量 FN组创面组织中羟脯氨酸和DNA含量在伤后7d时明显高于祛腐生肌散组,而蛋白质含量则在伤后14d时高于祛腐生肌散组。FN组、祛腐生肌散组创面组织中蛋白质、羟脯氨酸、DNA含量在伤后7d、14d均高于对照组。见表2。3组动物创面组织中蛋白质、羟脯氨酸和DNA含量的比较（x±s.n=12）组别蛋白质（µg/mg）羟脯氨酸（µg/mg）DNA（µg/mg）7d14d7d14d7d14dFN组115.7±78.6*259.1±69.6*^8.5±3.6*^14.1±3.9*^26.1±9.3*^57.5±27.5*祛腐生肌散组93.1±54.5*148.2±81.3*4
7、.7±1.6*6.6±3.0*2.4±5.9*42.1±14.9*对照组36.2±16.6103.3±55.62.1±0.53.9±1.86.1±2.722.4±8.23 讨 论FN是体内正常存在的一种糖蛋白,参与创伤修复的全过程。FN在伤口愈合中主要起以下作用:①作为趋化因子诱导外周血中的单核细胞及其他吞噬细胞、上皮细胞、成纤维细胞向伤口处运动(由于FN分子上有细胞结合位点)。②作为一种非特异调理素调动吞噬系统清除病菌及组织碎片,
