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时间:2020-09-06
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1、实验性质:设计性实验实验时间:4月中旬~5月中旬实验分组:3~4人一组有关要求:4月16日前提交实验设计方案,5月20日前提交实验报告。果蝇等生物有关性状的遗传学分析现有条件:材料:八种果蝇类型:野生型(+)、黑檀体(e)、残翅(vg)、白眼(w)、黑体(b)、短(小)翅(m)、白眼小翅(wm)、小翅黑体(mb)药品用具:相关试剂、用具遗传学实验室实验目的及要求1、实验目的:掌握有代表性实验材料的选取方法;掌握果蝇的性状遗传分析方法了解由性染色体上基因所控制的性状分离规律;要求能独立查阅相关资料,掌握实验结果的统计分析方法,理解孟德尔自由组合定律的基本内容;初步掌握设计实验的方法步骤。2、
2、实验要求:3~4人一组,每组任意选择2种类型的突变型,分析这两种突变型之间的遗传关系。要求每组做正反交,并进行预假设和适合度检验。实验前要写好设计方案,涉及原理、实验流程、预期结果、参考文献等。实验过程中:1、处女蝇的选择要准确。2、麻醉深度适当;3、若F1性状混杂,暂停;4、培养基不够用,自行配制,注意配方和数量;5、安排人员值班,每人2d,早、晚各1h。钥匙不得转手。同时督促各组做好开放实验登记和清洁卫生。果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。一、果蝇的生活史果蝇的生活史果蝇♀♂识别♀:腹部背面有五条黑条纹♂:腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面二、果蝇的雌雄
3、鉴别果蝇♀♂识别♀:无性梳♂:前腿跗节上有性梳果蝇的雌雄鉴别♀♂个体大小腹纹53腹部末端尖圆性梳无有腹片64三、果蝇的麻醉麻醉剂:乙醚麻醉方法:取一麻醉瓶,瓶口与培养瓶大小相仿,取一棉花塞,在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚,将果蝇转入麻醉瓶内,翻转麻醉瓶使瓶口朝上,迅速将滴有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口,约1min左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。再麻醉观察或计数过程中,果蝇可能苏醒,可准备一玻璃培养皿,内以胶带贴一小块棉球,滴入适量乙醚,培养皿口朝下置于一旁备用,如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下,盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。果蝇转入麻醉瓶方法死亡果蝇的标志四、果蝇的突变型果蝇具有丰
4、富的外表型态差异,包括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、刚毛形状与数目、体色等。翅脉横隔野生型,具有横隔脉,突变型,缺横隔脉体色翅形残翅长翅短(小)翅眼色白眼朱红眼墨黑眼红眼刚毛形态果蝇常见突变型残翅野生型棒眼小翅黑檀体白眼果蝇突变性状及基因突变型基因符号表现特征基因所在染色体白眼棒眼褐色眼猩红眼黑檀体黄体焦毛黑体匙形翅残翅翻翅短(小)翅wBbwsteysnbnub2vgCym复眼白色复眼条形小眼数少复眼褐色复眼猩红色身体乌木色身体浅橙黄色刚毛卷曲烧曲焦状颜色比黑檀体深翅小匙状翅退化,不能飞翅向上翻卷,纯合致死翅膀短小,不超过身体XXIIIIIIIIXXIIIIIIIIX五、果蝇的饲养1、培养瓶
5、、灭菌2、培养基的配制3、果蝇继代培养果蝇的饲养1、培养瓶、塞子灭菌牛奶瓶、大中型指管2、培养基的配制(1)果蝇培养基成份(100ml)水80ml玉米粉8.5g糖6.5g琼脂1.0g丙酸(苯甲酸)0.5ml(0.25g)酵母粉少许(2)配制方法玉米粉糖琼脂果蝇的转移转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶:取一新培养瓶,略为松动棉塞,放置于右手侧,取欲转移果蝇培养瓶于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面,左手拔起棉塞以两指夹住,右手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞,并将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍旧培养瓶
6、瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶内,迅速盖上各瓶棉塞。转移果蝇时,为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,可将培养瓶横放,将麻醉的果蝇倒于瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。注意事项麻醉剂的使用:乙醚有毒,挥发性强,使用时,要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。麻醉深度:麻醉果蝇时,要防止麻醉过度,影响继代培养。做好标记:新转移的培养瓶上需贴好标签,注明继代培养日期及实验者姓名。实验原理遗传基本规律:分离规律;自由组合规律;伴性遗传规律;连锁与互换规律。1、一对相对性状:长翅(雌)×残翅(雄);残翅(雌)×长翅(雄)2、两对相对性状:灰残(雌)×檀黑长(雄);檀黑长(雌)×灰残(雄)
7、3、伴性遗传:红(雌)×白(雄);白(雌)×红(雄)实验操作流程1、根据设计分取突变体2、果蝇饲养3、收集处女蝇。雌蝇羽化后8~12h不交配。亲本和F1雌蝇都必需是处女蝇。4、按组合收集雌雄蝇杂交,贴上标签(组合名称、杂交日期、小组名称)5、6~7d后,幼虫出现后,放去成蝇(记日期),种蝇要放干净。6、3~4d后,连续观察记录F1性状,并统计数字(麻醉后倒在白瓷板上进行统计)。F1性状若不符合设计要求,终止实验。7、选出
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