二维液相色谱进展与应用.ppt

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1、二维液相色谱的发展与应用组员:陈素婕樊雪付雪容黄露瑶马威杨旭杨洋游晓宇多维液相色谱理论:多维色谱理论最早由Giddings提出。他提出多维色谱的两条标准:1)样品组分必须经过两种或两种以上的不同分离模式。2)经一种模式分离的样品组分不应该在其后续的分离中被混合。二维液相色谱:将分离机理不同又相互独立的两根色谱柱串连起来构成的分离系统。二维液相色谱的发展尽管二维液相色谱技术目前还没有被广泛使用,但这方面的潜力是巨大的。大型公司,如安捷伦和岛津,都在投入资金开发这种仪器,让科学家能够回答之前无法回答的问题。目前,一些优秀的产品已上市。这种强大的技术可用在各种不同的领域,如制药、生物制药、

2、天然产物的研究和食品分析等。二维液相色谱有望成为分析中等至高度复杂的混合物的强大工具。二维液相色谱的构成:二维液相色谱的分类:根据切换系统不同进行分类:1)传统的中心切割技术色谱2)全二维液相色谱二维液相色谱的应用二维液相色谱法的应用二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用二维液相色谱法在差异蛋白质组学中的应用二维液相色谱法在羊草地上部总蛋白分离中的应用二维液相色谱法在体内药物分析中的应用......天然药物成分复杂,包括从无机物到有机物,从极性到非极性,从小分子到生物大分子的各种成分,预处理费时费力,操作困难

3、。2D-LC串联质谱技术简化了预处理过程,提高了峰容量与选择性。用2D-LC系统来分析天然药物中的非挥发性成分,并针对不同成分摸索了LC的选择和合适的条件,其中分别采用了强酸性阳离子交换柱或氨基柱与反向C18柱组成二维系统,接口三通阀内接15mmX4mm的C18富集柱来浓缩欲分离组分。进样12分钟后,富集柱上的组分被有机溶剂反洗到第二维分析柱中,并采用质谱检测。两种系统分别对生物碱组分和单唾液酸神经节苷酯等组分表现出良好的富集效果和分离能力。二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用.建立SAX-RP模式的在线二维液相色谱系统,并将其应用于鹿茸蛋白的分离、分析中。方法样品首先由第一维强

4、阴离子交换色谱(COSMOGELQAGlassPackedColumn,75mm×8.0mmI.D)在pH9.16的Tris-HCl缓冲体系中以0.8mL/min的流速洗脱分离,采用不连续的逐步增加盐浓度的8步台阶梯度方式洗脱,洗脱产物富集在与反相柱相同填料的捕集柱顶端,通过阀切换将富集在捕集柱上的组分反向冲入第二维反相分析柱(ShodexRspakRP18~415,150mm×4.6mmI.D)继续分析。结果鹿茸蛋白在所构建的二维系统上得到了较好的分离,与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率在一定程度上得到了提高,系统总出峰数为30,总峰容量为240。结论使用常规尺寸的色谱柱构成的

5、二维液相色谱系统仪器要求简单,对鹿茸为代表的动物类中药的分离、分析有一定指导意义二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用由于复杂体系样品分离需要更强的分离能力,二维色谱能使样品组分在两个不同的分离条件下进行分离,显著提高分离能力,降低色谱峰重叠,同时改善色谱峰鉴定的可靠性,在中药质量控制中发挥重要作用。不同的二维色谱技术中,在线全二维液相色谱技术由于其在较短时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高,成为对于复杂体系分离时最受关注,发展最迅速的技术。二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用展望Thank you

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