黄瓜细菌性白枯病菌寄主范围与生理生化特性研究.doc

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1、黄瓜细菌性白枯病菌寄主范围与生理生化特性研究　　摘要：黄瓜细菌性白枯病是黄瓜生产上的重要细菌病害，开展该病菌寄主范围和生理生化特性研究，对做好该病防治有重要意义。试验结果表明在人工接种条件下该病菌可侵染黄瓜、茄子、番茄等２４种作物，寄主范围较广；该病菌供试的１０个菌株与绿黄假单胞菌在３６项生理生化指标上反应一致，应同属于一个种。　　关键词：黄瓜细菌性白枯病；绿黄假单胞菌；寄主范围；生理生化特性　　中图分类号：Ｓ４３６．４２１．１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11402－0285-03　　　　ＨｏｓｔPｌａｎｔｓａｎｄ

2、PｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌBｉｏｃｈｅｍｉｃａｌCｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａCausingＣｕｃｕｍｂｅｒBａｃｔｅｒｉａｌWｈｉｔｅSｐｏｔ　　　　ＷＡＮＧＱｉｏｎｇ１，ＬＩＵＣｈａｎｇ－ｙｕａｎ２，ＺＨＡＯＫｕｉ－ｈｕａ２，ＬＩＡＮＧＣｈｕｎ－ｈａｏ２，ＷＡＮＧＨｕｉ２，ＧＵＡＮＴｉａｎ－ｓｈｕ２，ＬＩＵＬｉ１　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｃｒｉｔｉｃａｌｂａｃｔｅｒｉａｌｄｉｓｅａｓｅｓ，ｃｕｃｕｍｂｅｒｂａｃｔｅｒｉａｌｗｈｉｔｅｓｐｏｔｗａｓｃ

3、ｏｎｓｉｄｅｒｔｏｂｒｉｎｇｔｈｒｅａｔｔｏｃｕｃｕｍｂｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｒｅｓｅａｒｃｈesｏｎｔｈｅｈｏｓｔｒａｎｇｅａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓofthepathogenwouldbeｆａｖｏｒａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｔｈｉｓｄｉｓｅａｓｅ．Theresultsｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｃｏｕｌｄｉｎｆｅｃｔ２４ｃｒｏｐｓｓｕｃｈａｓｃｕｃｕｍｂｅｒ，ｅｇｇｐｌａｎｔandｔｏｍａｔｏｅｃｔ

4、．Ｂａｓｅｄｏｎ３６ｉｄｅｎｔｉｃａｌｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓofthepathogen，ｔｅｎｂａｃｔｅｒｉａｌｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｃｏｎｇｅｎｅｒｉｃｗｉｔｈＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓviridiflava．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：cｕｃｕｍｂｅｒｂａｃｔｅｒｉａｌｗｈｉｔｅｓｐｏｔ；Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａ；hｏｓｔｐｌａｎｔｓ；ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　　　　由绿黄假单胞菌引起的黄瓜细菌

5、性白枯病［ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａＤｏｗｓｏｎ１９３９］已成为辽宁、山东、黑龙江等省保护地黄瓜生产上危害较为严重的的重要细菌病害，该病主要侵染叶片，病斑圆形或近圆形，中间白色膜质，四周具黄色晕圈，病部没有菌脓。该病发病率一般为１０％～２０％，严重地块达４０％以上。目前国内对该病研究较少，刘长远等［１，２］对该病原菌的分类地位、系统进化及ＰＣＲ检测方法进行了研究，并构建了ＰＣＲ检测体系。国外有些学者对绿黄假单胞菌进行了研究，Ｇｏｕｍａｎｓ［３－８］认为该菌可侵染西瓜、番茄、茄子等寄主植物，明确了从番茄果实

6、上分离的绿黄假单胞菌的生理生化特性；Ｇｏｎｚ?�_ｌｅｚ等［5］学者测定了生理生化指标和１６ＳｒＤＮＡ序列。本文对该病菌开展了寄主范围及生理生化特性研究，以期为做好该病害的防治提供依据。　　１材料与方法　　１．１病样采集与病原菌分离　　２００６～２００９年，在辽宁、山东和黑龙江等地采集黄瓜细菌性白枯病病样。切取４ｍｍ×４ｍｍ病健交界组织，用７５%酒精浸泡１ｍｉｎ，３０ｓ后无菌水冲洗３次，放入灭菌研钵研碎，静置１５ｍｉｎ，然后用灭菌移植环蘸取上清液，采用平板划线分离法在ＮＡ培养基上进行分离，２８℃培养２４ｈ。用灭菌环挑取单菌

7、落，再用平板划线法培养纯化，放入４℃冰箱中保存备用。　　对照菌株：绿黄假单胞菌ＰＶ［ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａＤｏｗｓｏｎ１９３９］，由德国ＤＳＭＺ公司提供；黄瓜细菌性角斑病菌ＰＳＬ［Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅｐｖ．ＬａｃｈｒｙｍａｎｓＹｏｕｎｇ，Ｄｙｅ＆Ｗｉｌｋｉｅ］由中国农业科学院植物保护研究所提供。　　１．２致病性测定　　将分离的菌株在ＮＡ平板培养基上生长７２ｈ，然后用无菌水配成６×１０８ｃｆｕ/ｍＬ菌悬液，分别采用针刺点滴法和无伤点滴法接种黄瓜新鲜叶片，以清水作对照。每种菌接种６片叶，

8、接种后放在生长箱中２５℃保湿培养，每天观察发病情况，明确其致病性。　　１．３寄主范围测定　　选取藜科、菊科、十字花科、葫芦科、豆科、茄科、伞形科、禾本科、百合科、旋花科的２５种作物测定其致病性。将培养好的黄瓜细菌性白枯病Ｈ９菌株配成６×１０８ｃｆｕ/ｍＬ菌悬液，用针刺点滴法接种健康的幼嫩叶片，每种供试植