两株抗药性草莓枯萎病菌的生理生化特性研究

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1、山东农业大学硕士学位论文两株抗药性草莓枯萎病菌的生理生化特性研究姓名：姜莉莉申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：王开运20120615山东农业大学硕士学位论文捅婴为明确草莓枯萎病菌抗多菌灵突变体ZY-D及抗戊唑醇突变体ZY-W的生理生化特性，并分析其抗性风险和可能的抗性机制，本文以抗多菌灵达53．9倍的草莓枯萎病菌株ZY-D和抗戊唑醇达34．2倍的草莓枯萎病菌株ZY-W为材料，分别比较了两株抗性菌与敏感菌株ZY在苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活力、渗透压敏感性、相对渗率和可溶性蛋白含量等方面的差异，研究结果如下：1．通过紫外

2、分光光度计法测定三菌株体内的抗逆酶活力，我们发现在相同处理时间和药剂浓度条件下，两株抗性菌(zY-D和ZY-W)体内的PAL和POD活力均高于敏感菌株ZY，且随着药剂处理浓度的升高而逐渐上升，各药剂浓度下的活力均高于空白对照。三菌株的POD活力随着处理时间的延长而逐渐增高，在24h达到最高值；两抗性菌株(ZVD和ZY二W)的PAL活力呈先上升后下降的趋势，ZY-D菌株的PAL活力在6h达到最高值，ZY-W菌株在1．5哒到最高值，而敏感菌株体内的P：AL活力始终处于上升状态。2．以菌落直径法测定三菌株的渗透压敏感性，结果表明：两抗性菌株(ZY二D和

3、ZY二W)和敏感菌株ZY均对葡萄糖的高渗透压(8％)表现敏感，其中戊唑醇抗性菌株ZY-W对中高渗透压(6％、8％)均表现敏感。低剂量的氯化钠(209／L)对敏感菌株的菌丝生长有促进作用，高浓度时对菌丝生长表现出抑制作用。两抗性菌株(ZY-D和ZY-W)的菌丝生长与氯化钠浓度成负相关性，其中对戊唑醇抗性菌株ZY-W对氯化钠更为敏感。3．以电导率法测定三菌株细胞膜透性，结果表明：以不同浓度的戊唑醇药液处理戊唑醇抗性菌株ZY-W和敏感菌株ZY不同时间后，ZY-W菌株的相对渗率始终低于ZY菌株，表明其渗透压调节能力高于敏感菌株。以不同浓度的多菌灵药液处理

4、多菌灵抗性菌株ZY-D和敏感菌株ZY，ZY-D菌株的相对渗率均高于ZY菌株，表明其在较短的时间内渗出了更多的电解质。4．以考马斯亮蓝G250法测定三菌株的可溶性蛋白含量，其顺序为：ZY-W>ZY-D>ZY。菌株ZY-W和ZY-D体内的可溶性蛋白含量分别为ZY的1．34和1．19倍，且三个菌株间差异显著(脚．05)。5．通过酯酶同工酶图谱分析发现，ZY-W菌株存在Re：0．24的特征性谱带。关键词：草莓枯萎病菌；戊唑醇；多菌灵；抗性；机理两株抗药性草莓枯萎病菌的生理生化特性研究Ⅱ山东农业大学硕士学位论文AbstractInordertoconfir

5、mthephysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofcarbendazim．resistantisolateZY-Dandtebuconazole．resistantisolateZy-WofFusariumoxysporum￡sp．fragariae，andcalculatetheresistanceriskandmechanism，comparisonwasconducedbetweenZY-D谢m53．9folds’carbendazim-resistance，ZY-W、杭tll34．2folds

6、’tebuconazole—resistanceandZYontheactivityofphenylalanineammonialyase(PAL)andperoxidase(POD)，thesensitivitytoosmolarity,therelativeleakage，andthecontentsofsolutionprotein．Theresultswereasfollows：1．Thedefenseenzymeactivitiestested、ⅣimUVspectrophotometershowedthat：Underdifferen

7、tcondition,thePALandPODactivitiesofZY-DandZY-WwerealwayshigherthanthatofZYandtheactivitiesofthreeisolatesincreased、Ⅳiththeconcentrationoftreatedfungicide，谢tlleveryfungicidetreatmenthigherthanthecontr01．硼1cPODactivitiesofthreeisolatesincreased、Ⅳiththetreatmenttime，andreachedth

8、epeakat24h；thePALactivitiesofZY-DandZY-Wincreasedatfirstandthedecrea