溶血标本血钾的测定.doc

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1、利用溶血程度指数法校正溶血标本血清钾离子测定研究钱高潮黄旭东丁志祥金文涛张琪常州市中医医院检验科常州摘要目的对于一些不宜重新抽取血液的溶血标本，通过全自动生化分析仪中血清信息功能溶血程度H与血钾的相关性，探索一种简单方便的校正公式检测溶血标本中血钾浓度，供临床参考。方法分析溶血程度H与血钾的相关性并建立回归方程，研究不同人群中H=50时血钾浓度是否存在差异并通过外加溶血标准液和制备溶血标本两种方法进行验证。结果H与[K+]成正相关（r=0.9996），回归方程y=0.1068H+0.2789,当H在1~200（Hb约为95g/L）之间成线性；经单因素

2、方差检验，新生儿、成年男性和成年女性之间差异无统计学意义；两种方法验证均表明计算得到的K+与实际检测值之间差异无统计学意义，理论值平均相对误差3.0%，最大相对误差7.0%。结论通过全自动生化分析仪中血清信息功能溶血程度H和公式K未=K溶-0.1068H-0.2789能比较准确的测算出溶血标本中真实血钾浓度，这个公式不受患者年龄、性别的影响。关键词溶血；溶血程度H；血钾鉴于人红细胞脆性较大,多种原因可使标本发生不同程度的溶血,直接影响测定结果的准确性[1-5]。溶血会对许多检验结果产生影响，尤其在血钾检测中影响非常明显，因为人体体液中98%的钾分布于

3、细胞内液，细胞外液只占2%，钾在组织细胞内的平均浓度为150mmol/L，红细胞内钾浓度为105mmol/L，血清中钾浓度仅为3.5～5.5mmol/L，红细胞内钾浓度约为血清钾浓度的20倍，溶血后红细胞中的钾会释放到血清中，引起血钾浓度的升高,因此标本溶血是血钾误差的主要原因之一[6-8]。溶血标本为一类不合格标本，对于因采集、运输、保存不当等原因造成溶血必须查找原因，避免或降少溶血的发生，而对于容易溶血的标本（如儿科标本）、有红细胞结构异常的标本，血钾的检验结果很难保证。解决该问题的关键在于检验与临床的密切沟通。但有时临床有不方便立即复查的情况，

4、以及其他因素不宜重新抽取血液标本时，如果能探索出一个根据标本异常情况程度对检验结果进行校正的方法，给临床一个比较准确的报告，对临床将非常有意义。溶血后标本血钾的增高主要是由于红细胞被破坏而造成红细胞内的血钾释放所致。血清中血红蛋白的含量能直接反映出标本的溶血程度。如能通过检测血清中血红蛋白的含量，计算出因溶血造成血钾增高的部分，检测的血钾减去因溶血增高的血钾就能消除溶血对血钾的影响。现在配有血清信息功能的生化分析仪(如日立、罗氏、岛津系列生化分析仪)均可通过血清信息中溶血程度（Hemolytic简写：H）指数法直接测定Hb,试剂单一稳定,自动简便[9

5、]。鉴于上述思路，我们对溶血标本血钾的测定进行了研究，以期找到一种比较方便的检测方法。材料与方法1.1标本来源江苏省常州市中医医院2010年6月至2010年12月住院新生儿40例(1～20天)、成年男性40例（20～68岁）、成年女性40例（21～73岁）。1.2试剂与主要仪器：自配Tris-HCl缓冲液（pH7.4）；6.0mmol/LKCl标准液；胆红素标准液（上海生物制品研究所提供）；日立7600全自动生化分析仪；-70℃冰箱（SANYO）1.3溶血程度H及血钾的测定按日立7600全自动生化分析仪操作说明书要求设定血清信息使用项目样品吸量为10

6、µl,Tris-HCl缓冲液吸量为190µl,采用速率法,反应时间10分钟。设定血清信息参数C=1,B=；血钾的测定选用离子选择电极间接法。1.4溶血程度H与血钾相关性取抗凝血，离心去除血浆，用生理盐水洗涤红细胞3次，以压积红细胞的容积为准，加入等体积的生理盐水，-70℃冻存1小时，立即放入37℃水箱5分钟，反复冻溶2次，3000转离心5分钟，分离出Hb溶液，并用生理盐水调节至H=200的标准液,然后用生理盐水稀释成H为150，100，75，50，45，40，35，30，25，20，15，10，8，6，5，4，3，2，1共20种浓度Hb溶液,检测血钾

7、浓度（当H＜20时，用6.0mmol/LKCL标准液替代生理盐水进行稀释，血钾浓度通过计算得到）。1.5不同人群红细胞溶血H=50时血钾的测定选取我院2010年6月至2010年12月住院新生儿40例、成年男性40例、成年女性40例标本，制备Hb方法同上，将H调整为50，检测各标本血钾浓度。1.6验证试验1选取上述120例标本（新生儿40例、成年男性40例、成年女性40例标本）进行血清钾浓度检测，制备H=200的Hb标准液，向上述血清中加入不同比例的Hb标准液，检测标本溶血程度H及血钾浓度。1.7验证试验2选取上述120例标本（新生儿40例、成年男性4

8、0例、成年女性40例标本）进行血钾浓度检测，同时吸取少量红细胞到血清中，反复冻溶2次（方法同上），3000转