沙门菌属stn基因LAMP在食品卫生检验中的应用.pdf

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1、·预防医学·中国现代医生2014年4月第52卷第12期沙门菌属stn基因LAMP在食品卫生检验中的应用王胜启马艳艳李。静张勤河南出入境检验检疫局保健中心，河南郑州450003【摘要】目的评价LAMP在食品卫生沙门菌属检验中的应用效果。方法选择145份食品标本，采用LAMP方法和分离培养法进行检测，比较两种检测方法的阳性率。结果LAMP阳性率为12．4％，分离培养法阳性率为6．2％。两种方法比较差异有统计学意义<0．05)。两种方法的阳性符合率为77．8％，阴性符合率为91．9％。结论LAMP法用于食品卫生沙门菌属的检验，具有快速、方便、阳性率高等优点。【关键词】沙门茵属；环介导等温扩增；分

2、离培养；食品卫生检验【中图分类号】R155．5[文献标识码】B【文章编号】1673—9701(2014)12一O114—02ApplicationofsalmonellastnLAMPinsanitaryinspectionoffoodstufsWANGShengqiMAYanyanLIJingZHANGQinHenanInternationalTravelHealthCareCenter,EntryandExitInspectionandQuarantineBureauofHenanProvince，Zhengzhou450003，China【Abstract]ObjectiveToev

3、aluateapplicationofsalmonellaLAMPinsanitaryinspectionoffoodstuffs．MethodsSe—lected145foodsamplesweredetectedbyLAMPandseparatedcuhivationmethod．Positiveratewascompared．ResultsPositiverateofLAMPwas12．4％．andthatofseparatedcultivationmethodwas6．2％．Therewassignificantdifference<0．05)．Positivecoincidenc

4、erateoftwomethodswas77．8％，andnegativecoincidenceratewas91．9％．ConclusionSalmonellaLAMPforsanitaryinspectionoffoodstuffsshowsrapid，convenience，highpositiverate．【Keywords】Salmonella；LAMP；Sanitaryinspectionoffoodstuffs在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门菌引1．2检测方法起的食物中毒常列榜首[1]。我国已发现的血清型有2161．2．1标本前增菌将收集到的标本取25g，装入无菌个。传

5、统对沙门菌的检测主要有分离培养方法，虽然均质袋中，拍击式均质器拍打2rain，37℃培养10h。准确但是程序繁琐，而免疫学方法的敏感度相对较冷冻食品在45℃下解冻15min。低，PCR等敏感度和特异度均较高。但是设备要求1．2．2分离培养法将增菌后的145份标本取1mL．较高，在基层不容易推广应用口一。环介导等温扩增法接种于10mL的1TrB增菌液中，42％培养24h。另取(LAMP)是一种全新的核酸扩增方法，具有简单、快1mL。接种于10mL的SC增菌液中，37℃培养24h。速、特异性强的特点[41。本研究比较环介导等温扩增法分别取增菌液1环，接种于BS平板和XLD平板，检测食品标本沙门

6、菌属与分离培养法的一致性，探讨37℃培养24h。取可疑菌落3个，接种于TSI、营养琼其在食品卫生检验中的应用价值，现报道如下。脂平板和赖氨酸脱羧酶试验培养基，37℃培养24h。对于生化反应初步符合沙门菌特征的，从营养琼脂平1材料与方法板上取可疑菌落，生理盐水制成菌悬液。在微生物鉴1．1一般材料定系统上进行分析。如果BS平板及XLD平板上无可2013年6—8月选择145份食品标本，其中冷冻疑菌落，BS平板37℃继续培养24h，如果仍无可疑菌生肉20份，生鲜肉2O份，熟肉20份，非发酵豆制品落则为阴性。20份，速冻米面20份，生水产品l0份，冰激凌101．2．3LAMP检测方法取标本前增菌液1

7、mL，离心，份，沙拉10份，鲜榨果汁10份，生食类蔬菜5份。阳10000r／min，2min，弃上清，提取核酸，另取1L上性控制菌株：肠炎沙门菌。清液，制作待检模板DNA。引物由百壹星辰(北京)生物科技有限公司提供。检测145份标本DNA。反应结【基金项目】国家质检总局科技计划项目(2012IK227)CHINAMODERNDOCTORVo1．52No：12April2014中国现代医生2014年4月第52卷第12期·预