粪肠球菌体外根尖生物膜模型的建立及形态学研究-论文.pdf

《粪肠球菌体外根尖生物膜模型的建立及形态学研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、华西口腔医学杂志第32卷第4期2014年8月WestChinaJournalofStomatologyVo1．32No．4Aug．2014http：／／www．hxkqyxzz．net·323·l文章编号】1000-1182(2014)04-0323—05·基础研究·粪肠球菌体外根尖生物膜模型的建立及形态学研究曹日丹侯本祥首都医科大学附属北京口腔医院牙体牙髓科，北京100050【摘要l目的通过体外实验建立根尖生物膜模型，观察粪肠球菌根尖生物膜模型的形态及结构。方法选取人新鲜拔除的单根离体牙24颗，随机分为8组，每组

2、3颗，浸泡于粪肠球菌ATCC29212菌悬液中，分别于1、2、7d建立根尖生物膜模型。使用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜形成过程；使用碘化丙啶(PI)和刀豆球蛋白A异硫氰酸荧光素(ConA．FITC)对生物膜细菌及细胞外基质进行双染色，通过激光共聚焦扫描电子显微镜(CLSM)观察其形态和结构；计算生物膜覆盖率。结果随时问的增加，根尖样本表面细菌覆盖面积增加，7d组与1、2姐间的差异存在统计学意义(P<0．05)，1d与2衄间的差异无统计学意义(P>0．05)。7d组形成生物膜结构，其样本表面的覆盖率为l7．23

3、％+1．52％，样本表面有大量细菌附着，细菌被细胞外基质包绕，并呈群落分布。生物膜中的细菌被PI染成红色，细胞外基质被CortA．FITC染成绿色，可见多层次的空间结构以及亲水性通道。结论粪肠球菌根尖生物膜于培养7d时形成完整的生物膜结构，由细菌群落及其周围大量的不定型基质组成。I关键词J粪肠球菌；根尖生物膜；根管治疗后疾病I中图分类号lR780．2I文献标志码lAIdoi110．7518／hxkq．2014．04．002DevelopmentofanEnterococcusfaeealisperiapicalbi

4、of'dmmodelforvitromorphologicalstudyCaoRidan．HouBenxiang．(Dept．ofEndodontics，BeijingStomatologicalHospital，CapitalMedicalUniversity，Beijing100050，China)IAbstract]ObjeefiveThisstudyaimstodevelopandobserveamodelsystemoftheperiapicalbiofilmstructureofEntero—COCCU

5、Sfaecalis．faecal&)．MethodsAtotalof24intacthumansingle—rootedpremolarsextractedfororthodonticreasonswerecollectedandrandomlydividedintoeightgroups=3)．Thespecimensweresubjectedtoultravioletdisinfection，ino-culatedwithEfaecalis(ATCC29212)suspensionadjustedto1×10。

6、CFU。mL～，andincubatedat37℃for1，2，and7d．Specimengroupswerepreparedforscanningelectronmicroscopetoexaminethebiofilmformation．Thespecimensintheconfocallaserscanningmicroscope(CLSM)groupswerestainedwithpropidiumiodide(PI)andConA-fluoresceiniso—thiocyanate(ConA—FITC

7、)toexaminethebiofilmformation．Theimageswererandomized，andbiofilmcoverage(％)wasassessedusingPhotoshopCS5．ResultsThebiofilmcoverage(％)onthecementumincreasedwithincreasingincubationperiod．Thebiofilmcoverageofthe7dgroupwassignificantlyhigherthanthoseofthe1and2dgro

8、upsfP<0．05)．ThevaluesofthelattertwogroupswerenotsignificantlydifferentfP>0．05)．DenseaggregationscomposedofE．faecal~andtheamor-phousmatrixwereobservedontherootcementumsurfacesofthes