纳米载药微粒对粪肠球菌的体外抗菌研究

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1、分类号UDC硕士学位论文密级纳米载药微粒对粪肠球菌的体外抗菌研究Antimicrobialactivityofdrug--loadednanoparticlesonEnterococcustaecafisinvitro⋯1n‘一一‘●‘作者姓名：胡睿学科专业：口腔临床医学学院(系、所)：中南大学口腔医学院指导教师：李奉华副教授中南大学二0一二年五月答辩委员会主席原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南

2、大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：塑垦日期：巡L年上月墨目学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：塑盘导师日期：趁坠年』月琴日硕士学位论文中文摘要摘要目的比较

3、红霉素纳米羟基磷灰石缓释微球(nHA．P船V-PEG—EM)、红霉素纳米脂质体(EMNP)和氢氧化钙(Ca(OH)2)在体外对粪肠球菌的抑菌杀菌作用，分析其优缺点，为临床推广使用纳米载药微粒作为根管消毒剂提供实验依据。方法1．利用溶剂蒸发法制备nHA．PHBV-PEG．EM，采用乙醇注入．硫酸铵梯度．电机搅拌法制备EMNP，完成后检测纳米载药微粒的形态、粒径、载药量及包封率，并研究其体外释药特性。2．称量一定量成品Ca(OH)2粉剂，加入脑心浸液培养基(BHI)搅拌均匀，制备成氢氧化钙悬浊液。3．采用液体稀释法进行药敏实验，37"C厌氧培养粪肠球菌24d'

4、时后，肉眼观测r此～．PHBV-PEG-EM、EMNP$1：ICa(OH)2在体外对粪肠球菌的最小抑菌浓度(MIC)$1最小杀菌浓度(MBC)，并用MTT辅助确定MIC。4．运用液体扩散法比较不同浓度nHA．PHBV-PEG．EM、EMNP和Ca(OH)2在体外肉眼观察下对粪肠球菌抑菌圈的大小，评估纳米载药微粒的抗菌效果。5．制备2．Omg／mlnHA—PHBV-PEG-EM、2．5mg／mlEMNP和3．5mg／mlCa(OH)2各2ml，加入0．1ml菌液后放入37℃厌氧培养箱内，硕士学位论文中文摘要分别在1天，2天，3天，4天，5天，6天时用灭菌移液

5、枪从试管中取0．1ml液体移植于脑心浸液琼脂培养基(BHIA)上，平行各做三皿，作厌氧培养24h后，记录所得平板菌落数，用统计软件分析处理。结果1．nHA—PHBV-PEG．EM粒径分布较均匀，平均粒径控制在106．6nm，载药量为8．34％，包封率达85．84％，体外释药持续稳定。2．EMNP粒径分布较均匀，平均粒径控制在102．7nm，包封率为82．40％，载药量达8．22％，体外释药持续稳定。3．液体稀释法MIC和MBC实验结果：nHA．PHBV-PEG—EM的MIC为2．5mg／ml，MBC为3．0mg／m1．EMNP的MIC为3．0mg／ml，M

6、BC为3．5mg／ml；Ca(OH)2的MIC为4．0mg／ml，MBC为4．5mg／ml。加入MTT后测得的MIC与液体稀释法所得的MIC相同。4．液体扩散法实验结果：浓度在2．0mg／ml以上的nHA-PI-IBV-PEG—EM组和EMNP组，及浓度在3．0mg／ml以上的Ca(OH)2组对粪肠球菌的生长均有抑制作用。nHA．PHBV-PEG．EM组与EMNP组比较，其差异性不具有统计学意义(P>0．05)：nHA-PHBV-PEG-EM组与Ca(OH)2组以及EMNP组与Ca(OH)2组，其组间差异具有统计学意义(P<0．05)。5．用药时间对抑菌效

7、果的影响：2．0mg／mlnHA．PI-IBV-PEG．EM的抑菌作用随时间延长而增强，第5天以后抑菌作用趋于稳定；2．5mg／mlEMNP的抑菌作用随时间变化而增强，具有较佳的缓释效果；3．5mg／mlCa(OH)2抑菌效果随时间延长而减弱，在第6天时药物硕士学位论文中文摘要作用消失，出现菌落突增现象。结论1．体外抑菌实验表明，nHA-PHBV-PEG．EM、EMNP及Ca(OH)2对粪肠球菌均具有一定抗菌作用。纳米载药微粒的抑菌效果优于氢氧化钙。2．nHA．PHBV-PEG．EM和EMNP具有缓释药物效果，抑茵作用在一定时间范围内随时间增长而增强。关键

8、词粪肠球菌，红霉素，纳米羟基磷灰石，纳米脂质体，体外抑菌活性111