根系活力的测定[TTC法].ppt

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1、根系活力的测定[TTC法]制作人：刘新单位：生命科学学院植物生理学教研室一、实验目的H2O无机盐合成氨基酸和植物激素（ABA、CTK、GA等）根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量测定根系活力，为植物营养研究提供依据。理解植物根系活力的内涵掌握根系活力测定的原理与方法二、实验原理氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙（TTF）。生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化TTCTTF根系活力脱氢酶丙二酸碘乙酸琥珀酸延胡索酸苹果酸促进抑制（无

2、色，溶于水）（红色，不溶于水）三、实验材料水培或砂培小麦、玉米等植物根系。四、实验步骤—制作TTC标准曲线吸取0.25mLTTC加入10mL容量瓶Na2S2O4加少许Na2S2O4乙酸乙酯乙酸乙酯定容0.25mL0.50mL1.00mL1.50mL2.00mLTTC含量（μg）2550100150200乙酸乙酯作参比，测定485nm下光密度值，绘制标准曲线四、实验步骤—测定根系活力0.5g根尖样品0.4％TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml根充分浸没于溶液中37℃下暗保温1～3h加入1mol/L硫酸2ml取出根吸干水分与3～4ml乙酸乙酯和少量石英

3、砂在研钵内磨碎红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml空白试验作参比测485nm下吸光度与此同时做一空白实验，先加硫酸，再加根样品，其他操作同上查标准曲线，求四氮唑还原量五、实验结果＝四氮唑还原强度（mg/g(根鲜重)/h）四氮唑还原量（mg）[根重（g）×时间(h)]六、思考题1.植物的根与地上部分有何关系?2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹果酸各起何作用？3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？为什么？4.为什么要以杀死根系作为空白对照？