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1、XX大学毕业论文膀胱移行细胞癌组织VEGF和C0X2表达及意义2014年6月25日膀胱移行细胞癌组织VEGF和COX2表达及意义【摘要】FI的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化稱2(COX2)蛋白在膀胱移行细胞癌(TCCB)组织屮的表达及其与肿瘤生物学行为乞间的关系。方法采用免疫组化SP法检测68例TCCB和10例正常膀胱黏膜组织VEGF和COX2蛋白的表达。结果正常黏膜组织'PVEGF和COX2均不表达。在I〜III级和浅表性、浸润性TCCB组织屮VEGF的阳性表达率分别为23.07%、58.62%、84.61%和43.75%、77.77%,VEGF的阳性表达率
2、在不同组织学分级及不同临床分期的TCCB组织屮差异有极显著性(咒2=14.11、8.29,P0.01);复发组与未复发组其阳性表达率分别为78.94%和40.00%,差异有极显著性(咒2=10.77,PO.ODo在I〜III级和浅表性、浸润性TCCB组织中COX2的阳性表达率分别为15.38%、55.17%、80.77%和37.50%、75.00%,COX2的阳性表达率在不同组织学分级及不同临床分期的TCCB组织屮差异有极显著性(咒2=15.27、9.73,P0.01);在复发组与未复发组其阳性表达率分别为73.68%和36.67%,差异有极显著性(咒2=9.40,PO
3、.ODo在TCCB组织中,VEGF表达与COX2表达呈正相关(尸0.55,P0.01)。结论VEGF和COX2阳性表达与TCCB病理分级、浸润及复发关系密切,VEGF和COX2可以作为判定膀胱移行细胞癌恶性程度及复发的参考指标。【关键词】血管生成诱导剂;环氧化酶2;膀胱肿瘤;免疫组织化学;预后近年研究认为,恶性肿瘤的浸润转移与癌细胞的浸润能力及其在转移部位的生存能力等因素有关。血管内皮生长因子(VEGF),又称血管渗透因子或血管调理索,与恶性肿瘤的新生血管形成相关,在恶性肿瘤的发展和浸润转移过程屮发挥着重要作用[1]。环氧化酶2(COX2)作为前列腺索合成过程中的一个限
4、速酶,其过度表达与多种上皮性肿瘤发生发展关系密切[2〜4]。为了探讨VEGF和COX2在膀胱移行细胞癌(TCCB)组织屮的表达及其与肿瘤生物学行为的关系,本文采用免疫组织化学SP法检测了TCCB组织和正常膀胱黏膜组织屮二者的表达情况,现报告如下。1材料与方法1.1标本选择随机选取我院1999〜2002年经手术切除的初发性TCCB石蜡标本68例,男49例,女19例;年龄30〜85岁,平均60.2岁。临床病理分期按国际抗癌协会(UICCTNM)标准确定,其屮浅表性(Tis〜T1)肿瘤32例,浸润性(T2〜T4)肿瘤36例。病理分级按世界卫生组织(WHO)1998年标准确定,
5、其屮I级(G1)13例,I[级(G2)29例,III级(G3)26例。所选病例均有随访,其中复发38例。10例正常膀胱黏膜组织标本取H非肿瘤病人。标本均作5pm厚的连续组织切片,分别进行苏木精伊红、免疫组织化学染色。所有病例术前均未经放疗、化疗及免疫治疗。1.2检测方法采用免疫组化SP法。鼠抗人VEGF单克隆抗体和鼠抗人COX2单克隆抗体为SantaCruzBiotech公司产品,工作浓度为1:100;生物素化羊抗鼠IgG及SP试剂盒为北京屮山生物有限公司产品;DAB为Sigma公司产品。用已知胃癌阳性切片作阳性对照,用PBS代替一抗作阴性对照,DAB显色,苏木精复染,
6、屮性树脂封片。具体操作步骤按试剂盒说明书进行。1.3结果判定标准VEGF表达的判定:以肿瘤细胞及其附近的血管内皮细胞胞质出现黄色或棕黃色为阳性染色,无瘤细胞着色或着色瘤细胞数<10%为阴性表达,着色瘤细胞数210%为阳性表达。COX2阳性表达的判定标准:胞质和核膜染为棕黄色或棕褐色的细胞为染色阳性细胞,连续观察5个高倍视野,各计数100个细胞,阳性细胞占肿瘤细胞数N10%为阴性表达,着色瘤细胞数N10%为阳性表达⑸。1.4统计学处理采用SPSS11.0软件进彳亍%2检验及Spearman和关分析。果2结2.1TCCB组织屮VEGF蛋白的表达VEGF主要着色部位为癌细胞胞
7、质,部分癌细胞周围的血管内皮细胞的细胞质也着色,位于浸润边缘的癌细胞染色较重。68例TCCB组织屮42例VEGF蛋片表达阳性(61.76%),10例正常膀胱黏膜上皮组织VEGF蛋白的表达均为阴性,二者差异有极显著意义(咒2=11.01,PO.ODo2.1TCCB组织屮COX2蛋白的表达COX2主要着色部位为癌细胞胞质,少数为核膜着色,部分癌细胞周围的血管内皮细胞的细胞质亦有着色。68例TCCB组织屮39例COX2蛋白表达阳性(57.35%),10例正常膀胱黏膜丄皮组织COX2蛋白的表达均为阴性,二者差异有极显著意义(咒2=11.47,PO