灰皮支黑豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其在胞囊线虫胁迫下的表达分析-论文.pdf

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1、河南农业科学，2014，43(6)：94—97JournalofHenanAgriculturalSciences灰皮支黑豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其在胞囊线虫胁迫下的表达分析刘大伟。，陈立杰，段玉玺。(1．东北农业大学农学院，黑龙江哈尔滨150030；2．沈阳农业大学植物保护学院，辽宁沈阳110866)摘要：研究大豆胞囊线虫侵染后胰蛋白酶抑制剂基因的表达情况，以明确其在大豆抗胞囊线虫机制中的作用。以高抗大豆胞囊线虫(HeteroderaglycinesIchinohe)3号生理小种的大豆品种灰皮支黑豆(ZDD2315)根系的总RNA为模板，利用RT—PCR技术获

2、得了573bp的胰蛋白酶抑制剂基因的CDS序列。同时利用Real～TimeQuantitativePCR技术分析了大豆胞囊线虫3号生理小种胁迫下胰蛋白酶抑制剂基因在抗(灰皮支黑豆)、感(辽豆15)品种根内的相对表达量。结果表明：大豆胞囊线虫侵染后，胰蛋白酶抑制剂基因在灰皮支黑豆根内的相对表达量始终高于辽豆15，并且在大豆胞囊线虫侵染20d时，灰皮支黑豆根内的胰蛋白酶抑制剂基因的相对表达量达到最高值，为辽豆15表达量的5．8倍。关键词：灰皮支黑豆；胰蛋白酶抑制剂；大豆胞囊线虫；实时PCR中图分类号：$435．651文献标志码：A文章编号：1004—3268(2014)

3、06—0094—04CloningofSoybeanKunitzTrypsinInhibitorGenefromHuipizhiheidouandExpressionAnalysisinSoybeanInfectedbyHeteroderaglycinesLIUDa—wei一．CHENLi—jie．DUANYu—xi。(1．CollegeofAgriculture，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；2．PlantProtectionCollege，ShenyangAgriculturalUniver

4、sity，Shenyang110866，China)Abstract：TheobjectiveofthisstudywastoresearchtheexpressionofKunitztrypsininhibitorgeneinsoybeaninfectedbysoybeancystnematodeandtoclearitsfunctionintheresistantmechanism．ThesoybeanKunitztrypsininhibitorgenewasobtainedfromrootsofHuipizhiheidou(ZDD2315)withhighre

5、sistancetoHeteroderaglycinesrace3byRT—PCR，andsequenceanalysisindicatedthattheclonedDNAfragmentconsistedof573bp．TheexpressionofKunitztrypsininhibitorgenewasdetectedintheresistantHuipizhiheidouandthesusceptibleLiaodou15infectedbvHeteroder。glvfinesrace3byReal—TimeQuantitativePCR．Theresult

6、sshowedthattherelativeexpressionlevelofKunitztrypsininhibitorgenewashigherinHupizhiheidouthaninIiaodou15atalltimes，anditreachedthehighestinHuipizhiheidouat20dafterinoculatedwithHeteroderaglycinesrace3，5．8times3ShighasLiaodou15．Keywords：Huipizhiheidou；trypsininhibitor；Heteroderaglycines

7、；realtimePCR收稿日期：2013—10—08基金项目：国家现代农业产业技术体系大豆岗位科学家专项资助项目(CARS一04一PS13)；农业部公益性行业科研专项(200903040)；东北农业大学博士启动基金项目(2012RCB99)作者简介：刘大伟(1983一)，男，辽宁沈阳人，讲师，博士，主要从事大豆抗胞囊线虫研究。E—mail：liudawei353@163．CON*通讯作者：段玉玺(1964一)，男，辽宁海城人，教授，博士生导师，主要从事植物病原线虫学研究。第6期刘大伟等：灰皮支黑豆胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其在胞囊线虫胁迫下的表达分析95大豆胞