灰皮支黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种侵染和发育的影响-论文.pdf

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1、作物杂志Crops20l4．1灰皮支黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种侵染和发育的影响刘大伟，陈立杰段玉玺(东北农业大学农学院，150030，黑龙江哈尔滨；沈阳农业大学植物保护学院，110866，辽宁沈阳)摘要以辽豆15作感病对照，通过接种相同或完全不能完成其生活史。从这一理论出发，抗性数量的卵并利用次氯酸钠一酸性品红染色法研究我机制可以分为抗侵入、抗扩展、抗发育和抗繁殖]。国的优质抗源灰皮支黑豆对大豆胞囊线虫3号生理灰皮支黑豆(ZDD2315)是较好的抗源，对大豆胞囊小种侵染和发育的影响。结果表明，接种后抗感品线虫1、2、3、4、5、7、14号生理小种均表现出抗性j。种根内的二龄幼虫数量很

2、接近，灰皮支黑豆根内的本研究利用次氯酸钠一酸性品红染色法研究灰皮支三龄幼虫数量高于辽豆15，但四龄幼虫、雌成虫数黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种侵染和发育的影量却低于辽豆15，雄成虫数量比较接近，即灰皮支响，同时利用冰冻切片技术研究抗、感品种灰皮支黑黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小种的抗性不具有抗豆和辽豆15受大豆胞囊线虫3号生理小种侵染后侵入的作用，而具有抗发育的作用。同时利用冰冻根部的组织病理学反应，揭示灰皮支黑豆对大豆胞切片技术研究灰皮支黑豆和辽豆15受大豆胞囊线囊线虫3号生理小种的抗性机制。虫3号生理小种侵染后根部的组织病理学反应，初1材料与方法步明确灰皮支黑豆对大豆胞囊线虫3号生理小

3、种的组织结构抗性。1．1供试材料关键词灰皮支黑豆；大豆胞囊线虫；侵染；发育抗病品种灰皮支黑豆(ZDD2315)；感病品种辽豆15。大豆胞囊线虫(HeteroderaglycinesIchinohe)是表1供试大豆品种对大豆胞囊线虫不同生理小种的反应世界大豆生产上的一种毁灭性病原物，主要分布于中国、美国、巴西、加拿大、俄罗斯、13本等国家，对大豆生产危害极大。受害大豆一般减产30％～50％，严重时甚至绝产。在日本东北地区约有50％的大1．2试验方法豆遭受该病危害。巴西大豆的受害面积为170万1．2．1大豆胞囊线虫胞囊的获得大豆胞囊线虫hm，每年损失1．5亿美元。我国东北和黄淮海产采自沈阳农

4、业大学北方线虫研究所感染大豆胞囊线区几乎普遍发生，每年危害面积达200万hm以虫3号生理小种试验地繁殖圃，采用改良淘洗一过上L1]。采用轮作、杀线虫剂、生防菌等防治方法可筛法从采取的土样中分离胞囊，在体视解剖镜下用以在一定程度上控制大豆胞囊线虫的危害，而利用自制的玻璃挑针挑出新鲜饱满成熟的胞囊。胞囊先抗病品种是防治该病的主要途径。用0．5％NaCIO溶液消毒3min，再用无菌水冲洗3大豆胞囊线虫在寄主植物上完成一个生活史需次，干燥后4℃保存备用。要多个阶段，包括卵的孵化、寻找寄主、侵染寄主、取1．2．2大豆胞囊线虫卵悬液的制备将饱满的胞食、生长、发育、性成熟和产卵。寄主的抗性主要表囊放入

5、组织破碎器中，用组织破碎器芯轻轻扭动现为影响其中任何一个阶段受阻，使线虫只能部分1～2次后用吸管加入5～10mL自来水，把胞囊碎皮作者简介：刘大伟，讲师，从事大豆抗胞囊线虫研究及卵洗入烧杯内，然后倒入200目和500目筛子组，段玉玺为通信作者，教授，主要从事植物病原线虫学研究基金项目：国家现代农业产业技术体系岗位科学家专项资助(CARS．用自来水轻轻洗下200目筛子上的卵，收集500目04．PS13)；公益性行业科研专项(2o09o3o40)；东北农业大筛子内的卵于烧杯内，制成浓度约为2000卵／mL学博士启动基金(2012RCB99)收稿日期：2013—10—21；修回日期：2013—

6、11—06的卵悬液。】452014．1作物杂志Crops1．2．3大豆胞囊线虫的接种将供试大豆种子用的发育具有阻碍作用(见表3)。湿润的医用纱布包裹，置于培养皿中，25~C条件下催表3抗感品种单株根内大豆胞囊线虫的各龄数量芽，期间及时换水。催芽后将种子移栽至装有经过高温灭菌的砂土混合物(体积比1：2)的黑色塑料钵中(16cm×16cm)。在大豆苗期接种1mL大豆胞囊线虫3号生理小种的卵悬液，每个大豆品种接种52．3抗感品种受大豆胞囊线虫侵染后根部的组织株，3次重复，置于温室内培养，定期浇水。病理学反应1．2．4大豆根组织内线虫的染色将接种后10d冰冻切片表明，接种大豆胞囊线虫3号生理小的

7、大豆幼苗从砂土中取出，用水冲洗干净根系表面种后10d，感病品种辽豆l5根部木质部导管附近的的砂土，然后参照刘维志的方法对大豆幼根进行细胞形成较大的合胞体，抗病品种灰皮支黑豆鞘细次氯酸钠一酸性品红染色。胞处的细胞结构发生变化，形成了合胞体，但细胞较1．2．5大豆胞囊线虫发育的水培试验将供试大小，且染色较深，呈细胞坏死反应特征。豆幼苗放人盛有100mLHoagland’S全营养液的三角瓶中，并加入3mL大豆胞囊线虫3号生理小种的卵悬液，