级生物化学实验期末复习题考试.doc

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1、生物化学实验（2）理论习题一、名词解释题1、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的点泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，而电荷因素可以被忽略。当蛋白质的分子量在15KD到200KD之间时，电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系，可以用来测定蛋白质亚基的分子量。2、电泳：带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳3、层析分离技术：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。4、吸附色谱法：利用同一

2、吸附剂对混合物中不同成分吸附能力的差异，从而使各成分达到分离目的的色谱法。5、离子交换层析：以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。6、分配层析：根据一种或多种化合物，在两种不相融合的溶剂间的分配来分离物质的方法。7、亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。8、凝胶层析（凝胶色谱）：混合物随流动相经过凝胶层析柱时，由于各组分流经体积的差异，使不同分子量的组分得以分

3、离的层析方法。9、电渗作用：指在电场作用下液体(通常是水)相对于和它接触的固定的固体相作相对运动的现象。10、担体：担体是一种化学惰性的，多孔性的固体微粒，能提供较大的惰性表面，使固定液以液膜状态均匀地分布在其表面。11、死时间：从进样到惰性气体峰出现极大值的时间称为死时间.。12、保留时间：被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，也即从进样开始到出现某组分色谱峰的顶点时为止所经历的时间，称为此组分的保留时间。13、高效液相色谱法：，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混

4、合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。二、填空题1、蛋白质分离常用的色谱法有（纸色谱法），（离子交换色谱），（疏水色谱法）和（免疫亲和色谱法）。2、离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有（提高离子强度）和（调节pH值）。7/73、根据分离机理的不同，色谱法可分为（吸附色谱），（离子交换色谱），（凝胶色谱），（分配色谱）和（亲和色谱）。4、聚丙烯酰胺凝胶由（单体丙烯酰胺）和（甲叉双丙烯酰胺）聚合而成，聚合时以（过硫酸铵(APS)）为催化剂，以（四甲基乙二胺(

5、TEMED)）为加速剂。5、离子交换树脂主要分为（阳离子交换树脂）和（阴离子交换树脂）两类6、气相色谱仪的核心部件是（色谱柱(包括固定相)和检定器）。7、SDS-PAGE电泳中，SDS的作用是（阴离子去污剂，作用有四：去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠），β-巯基乙醇的作用是（破坏蛋白质的二硫键）。8、不连续体系的SDS-PAGE电泳分离蛋白质时，具有（分子筛效应）、（）、（）三种效应。9、食品中亚硝酸盐含量测定中，硼酸主要起到（缓冲溶液的作用）和（）的作用。10、亚硝酸盐提取过程中，加

6、入的亚铁氰化钾及硫酸锌的作用是（沉淀蛋白质）。11、亚硝酸盐作为食品添加剂允许在食品加工中限量使用，具有（）、（）、和产生风味的作用。12、亚硝酸盐提取过程中，制作规范曲线时，先在弱酸条件下在亚硝酸盐中加入（），然后再加入（），偶合形成（）染料后，用分光光度法进行测定。13、凝胶层析中，先被洗脱下来的是相对分子质量（大）的分子，而SDS-PAGE中跑的快的是相对分子质量（小）的分子。三、选择题1、下面关于SDS的说法正确的是：（A）A、常用的变性剂B、常用的提取试剂C、常用的盐析剂D、常用的萃取剂2、琼脂糖凝胶孔径由（B）决

7、定的A、交联度B、琼脂糖浓度C、琼脂糖密度D、颗粒大小3、HPLC是哪种色谱的简称：（C）：A、离子交换色谱B、气相色谱C、高效液相色谱D、凝胶色谱4、针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是：（C）A、凝胶过滤B、离子交换层析C、亲和层析D、纸层析5、盐析法沉淀蛋白质的原理是：（B）A、降低蛋白质溶液的介电常数B、中和电荷，破坏水膜C、与蛋白质结合成不溶性蛋白D、调节蛋白质溶液pH到等电点6、蛋白质分子量的测定可采用一下哪种方法：（D）A、离子交换层析B.、亲和层析C、凝胶层析D、聚酰胺层析7/77、电泳时pH值、颗粒所带

8、的电荷和电泳速度的关系，下列描述中正确的是：（D）A、pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越慢B、pH值离等电点越近，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快C、pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越少，电泳速度也越快D、pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快8、醋酸