分子生物学检验技术教学大纲

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1、分子生物学检验技术教学大纲值得拥有的资料是来自平时学习积累总结的有问题的地方肯定有的还请大家批评指正！分子生物学检验技术教学大纲第一章原核生物基因组和病毒基因组[目的要求]掌握基因的分子生物学定义;限制性片段长度多态性的概念；质粒的定义和用途；操纵子的结构熟悉病毒基因组和细菌基因组的特点原核细胞内核酸含量、种类、功能和组织结构的差异;了解转座因子大肠杆菌、HIV和HBV基因组特点[教学时数]3学时[讲授内容]基因的概念基因的生物学定义、基因的分子生物学定义、细胞基因组原核生物和真核生物生物种类、原核细胞和真核细胞内核酸含量、种类、功能的差异操纵子结构病毒基因组：重叠基因HBV和HI

2、V等病毒的结构特点细菌基因纽细菌染色体基因组的结构特点;大肠杆菌、质粒[复习思考题]名词解释　　基因、质粒、断裂基因、假基因、限制性片段长度多态性、操纵子　　问答题　　　1·简述原核细胞基因组特点第二章真核生物基因组[目的要求]掌握真核生物基因组的特点;单拷贝序列、中度重复序列和高度重复序列的概念　　熟悉：染色质的结构和主要成分、核小体是染色质的基本结构单位了解染色体形态、功能研究中所用术语与新技术简介、朊病毒[教学时数]3学时[讲授内容]真核生物学特点一般特点、C值矛盾、真核生物DNA序列的类型(单拷贝序列、中度重复序列、高度重复序列、人多基因家族、DNA指纹技术(限制性片段长度

3、多态性)染色体的主要成分、染色体的分型、染色体疾病[复习思考题]　　名词解释单顺反子、外显子、内含子、C值矛盾、单拷贝序列、中度重复序列、高度重复序列　　问答题　　真核生物基因组的特点　　　　第三章癌基因和抑瘤基因　　[目的要求]　　掌握癌基因和抑癌基因的概念；癌基因激活的机制　　　　熟悉sis家族、src家族、myc和myb家族、P53、RB家族及其表达产物；癌基因和抑癌基因的检测　　　　了解肿瘤发生的步骤；结肠癌的发病步骤　　[教学时数]　　3学时　　[讲授内容]　　肿瘤细胞的特征　　肿瘤病毒和癌基因DNA肿瘤病毒和癌基因;反转录病毒和癌基因　　肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因存在的证

4、据;RB基因p53基因　　肿瘤形成的多步骤学说多步骤学说的实验证据;人类直肠癌和多步骤致癌论　　[复习思考题]　　名词解释　　癌基因、肿瘤抑制基因、反转录病毒　　问答题　　l简述RB基因和p53的功能　　2.原癌基因的激活的机制　　　　第四章蛋白质组和蛋白质组学[目的要求]掌握蛋白质组概念；二维电泳熟悉蛋白质组的研究范畴；研究蛋白质组的基本方法（如酵母双杂交、凝胶滞后电泳等）了解蛋白质的数据库；蛋白质的医学应用[教学时数]3学时[讲授内容]　　蛋白质组的概念和特点　　蛋白质组的研究范畴　　蛋白质和蛋白质的相互作用的研究方法（酵母双杂交、噬菌体展示、生物传感芯片质谱、蛋白质定点诱变）

5、　　蛋白质和核酸相互作用的研究方法（凝胶滞后试验、滤膜结合法、甲基化干扰实验、DnaseI足纹分析等）　　蛋白质质点的分离和鉴定（二维电泳、质谱技术等）　　蛋白质的结构分析　　蛋白质的数据库[复习思考题]概念蛋白质组、凝胶滞后实验简答题1.蛋白质和核酸相互作用的研究方法有哪些？2.二维电泳的基本原理是什么？3.酵母双杂交系统的原理第五章核酸的分离和纯化[目的要求]掌握基因组DNA的分离方法和原理；质粒DNA分离方法和原理；核酸的浓度和纯度鉴定熟悉核酸分离的基本原则；RNA抽提；mRNA的分离和纯化了解CsCl-EB法的原理核酸的回收和保存[教学时数]3学时[讲授内容]　　核酸抽提的

6、原则　　核酸的分离、纯化、浓缩、洗涤　　核酸的保存、浓度和纯度鉴定（紫外分光光度法、荧光光度法）　　基因组DNA分离的原理各试剂的主要用途　　DNA的回收（DEAE纤维素膜插片电泳法；电泳洗脱法；低熔点琼脂糖凝胶回收法）　　质粒DNA的提取和纯化（碱裂解法、煮沸法）　　质粒DNA的纯化和回收　　RNA的抽提和mRNA的分离[复习思考题]　　问答题1.酚-氯仿法抽提基因组DNA的原理2.质粒制备的主要方法是什么？并阐明其基本原理3.如何鉴定核酸的浓度和纯度第六章DNA重组概述[目的要求]掌握基因重组的主要工具酶和它们的作用；DNA重组的主要载体和它们各自的优点熟悉克隆和DNA重组的概

7、念、基因重组的基本步骤了解基因重组的发展历史；重组DNA技术意义[教学时敷]3学时[讲授内容]　　分子生物学简史、DNA重组技术构建和大肠杆菌转化体系的建立;重组DNA技术的定义及步骤重组DNA技术定义重组DNA技术基本步骤重要的工具酶限制性核酸内切酶(命名、分类、11型限制酶的功能、应用及注意事项况）；DNA聚合酶(大肠杆菌DN人聚合酶I及其大片段、TagDNA聚合酶、反转录酶)DNA连接酶;T4多核苷酸激酶;碱性磷酸酶主要的载体：质粒载体（pBR322、pUC等）