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《研究丙型肝炎病毒NS4B对肝细胞c2myc和ras蛋白表达的影.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·637·肿瘤防治研究2006年第33卷第10期丙型肝炎病毒NS4B对肝细胞c2myc和ras蛋白表达的影响1123陈霞,李昌平,徐建玉,陈枫TheEffectofHCVNS4BonExpressionsofc2mycProteinandrasProteininHepaticCells1123CHENXia,LIChang2ping,XUJian2yu,CHENFeng1.DepartmentofDigestivedisease,AffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege,Luzhou646000,China;2.Departm
2、entofDigestiveDisease,TheSuiningPeople'sHospital;3.DepartmentofInfec2tiousdisease,AffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollegeAbstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofhepatitisCvirusnon2structuralprotein4B(HCVNS4B)onc2mycandrasgeneexpressionsinhepaticcells,andtostudythepossibleroleintheca
3、rcinogenesisofhepatoma.MethodsTheexperimentwasdividedintonegativecontrol、emptyvectorPCXN2andPCXN22NS4B.Therecombinantplasmid(PCXN22NS4B)andtheemptyvectorweretransfectedintoChanglivercellswithliposome.ScreeningwasperformedwithG418.HCVNS4BmRNAwasdetectedbyreverse2transcriptionPCR.Theprot
4、einexpressionsofc2mycandraswereanalyzedbyimmunohistochemistry.Re2sultsStableexpressionoftherecombinantplasmidwasfoundintransfectedChanglivercells.Noexpres2sionofc2mycgenewasfoundincontrolgroupandgroupPCXN2.Theexpressionofc2mycgeneingroupPCXN22NS4Bwas21.3%1.2%.Theexpressionsofrasgeneinc
5、ontrolgroupandgroupPCXN2werelowerthanthatinPCXN22NS4B.ConclusionHCVNS4Bpromotetheexpressionofc2mycandrasgene,suggestingthatHCVNS4Bmaycontributetotheviralcarcinogenesis.Keywords:HepatitisCvirus;Non2structuralprotein4B;c2myc;ras;G418摘要:目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(NS4B)对肝细胞内癌基因c2myc和ras蛋白表达的影响,从而探讨
6、其在肝癌发生机制中的可能作用。方法通过脂质体介导法,将空白载体PXCN2及丙型肝炎病毒NS4B重组质粒PCXN22NS4B引入Chang肝细胞内,并G418筛选作稳定传代,RT2PCR法鉴定质粒成功转染入肝细胞内,免疫细胞化学方法观察细胞内c2myc和ras表达情况。结果获得具有G418抗性的Chang肝细胞;空白对照组及空白载体组无c2myc表达,转染NS4B组c2myc表达率为(21.3±1.2)%,与空白对照组及空白载体组比较差异有显著性;空白对照组及空白载体组ras弱阳性表达,转染NS4B组ras呈阳性表达,与空白对照组及空白载体组比较差异有显著性。结论丙型
7、肝炎病毒NS4B可促进癌基因c2myc和ras表达,并可能在丙型肝炎病毒的致癌机制中起重要作用。关键词:丙型肝炎病毒;非结构蛋白4B;c2myc;ras;G418中图分类号:R735文献标识码:A文章编号:100028578(2006)10207362030引言癌作用可能与细胞凋亡受抑,癌基因及抑癌基因的丙型肝炎为全球流行性传染性疾病,据估计全突变及表达量的异常,细胞信号传导异常等有关。球丙型肝炎病毒(HCV)感染者超过1亿人。原发c2myc和ras为重要的原癌基因,大量的研究发现,性肝癌(HCC)是一种严重威胁人类健康的恶性肿c2myc和ras在HCV相关肝癌