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时间:2020-03-26
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1、一、血液的组成和功能:普通正常人血液量约为体重的7%左右,可分为液体的血浆(Plasma)和血细胞(BloodCells)两部分,其中血浆约占55%,血细胞约占45%。血浆由水、食物营养成份、代谢废物、激素、抗体、酶、蛋白质等组成。红细胞(RBC)(内含血红蛋白)血细胞分为3种白细胞(WBC)(俗称血球)血小板(PLT)三者在血液中的数量比约为RBC:WBC:PLT=500:1:30。嗜中性粒细胞(Neutrophil)粒细胞(75%)嗜酸性粒细胞(Eosinophil)(Granulocyte)嗜碱性粒细胞(Basophil)W
2、BC又分为淋巴细胞(25%)(Lymphcyte)单核细胞(5%)(Monocyte)人类生理和病理的变化,往往会引起血液组分的变化,比如全身各组织的感染性炎症可引起血液内白细胞总数和分类计数的改变。所以及时了解血液组分的变化,可以为医生提供诊断与治疗疾病的重要依据。所谓血球计数主要是计数单位容积中红细胞、白细胞和血小板的个数,它已成为各级医院进行血液常规检验的必做项目之一。RBC、PLT和大多数WBC在骨髓生成,其功能特点如下:生命周期功能正常值直径体积RBC120天运送O2和CO23.5~5.5×1012/L6~8m60~12
3、0m3(fl)WBC7天抗感染,产生抗体参与免疫反应3.2~9.7×109/L8~20m120~1000m3(fl)PLT8~10天止血、凝血100~300×109/L2~4m2~30m3(fl)二、血液标本的收集和处理:血液自血管内采出后如不加抗凝剂将很快发生凝集反应,形成血凝块(由血细胞和纤维蛋白等凝缩而成)和淡黄色的血清(SERUM),该反应是不可逆转的,标本将无法用于血细胞测定。所以要进行血细胞分析必须对血液进行抗凝处理,国外大多数已采用静脉抗凝血标本,国内则以末梢血(即指尖血或耳垂血)标本为主。抗凝剂:以EDTA为进行血
4、细胞分析的首选抗凝剂,浓度为EDTAK2:1.5~2.2mg/ml全血,室温24小时内,白细胞、红细胞、血小板测定结果不变。白细胞分类可稳定6~8小时,血红蛋白可稳定数日,但镜下的白细胞分类,2小时后粒细胞形态即有变化,故需作镜检分类者,应及早推制血片。标本采集注意事项:A.静脉抗凝血采集后应立即连续充分混匀2分钟,加盖。A.若在4小时内测定,标本放室温下;若要在4小时后测则要放在5°C,但低温贮存时血小板和MPV值会受影响。B.冰箱内取出的抗凝血应恢复至室温时才能测定。C.毛细采样管采取的末梢血要立即加入稀释液中混匀,避免形成血
5、凝块和PLT聚集,应特别注意稀释溶血现象。三、血液细胞分析仪的工作原理:传统的血细胞计数是将血液稀释后,滴在有分划的玻璃片上,在显微镜下用人工计数。这种计数方法速度慢、劳动强度大、眼睛易疲劳、计数精度低,且误差因人而异,通常在±5%~±10%之间。随着检验标本量的增加和对精度要求的提高,使得这种传统的血细胞计数方法远不能满足临床要求。随着电子工业和计算机技术的发展,人们已研制成精密的电子血液细胞分析仪,简称血球计数仪或血球仪。工作原理:变阻法(又称电阻抗法)血细胞是电的不良导体,标本稀释液为电解质溶液,能使血细胞保持在血液中的原有
6、形状。悬浮在稀释液中的血细胞在负压作用下一个一个地通过内外电极间的计数微孔时,将明显增大整段电解液的等效电阻,而该电解液外接恒流电源,则此时电解液两极产生电压脉冲信号,电脉冲的大小直接与血细胞的电阻率成正比,即与血细胞的体积相关。如果控制定量溶有血细胞的电解液通过微孔,则可得到一连串不同幅度的脉冲信号,对这些脉冲个数计数,就可得到血细胞数量,这就是变阻脉冲法(简称变阻法)的原理。白细胞计数、HGB测量和红细胞/血小板计数血细胞中红细胞、白细胞和血小板正常体积范围约为:RBC:60~120fl、WBC:120~1000fl、PLT:
7、2~30fl,三者在血液中的数量比约为:RBC:WBC:PLT=500:1:30。由于红细胞的大小与小的白细胞类似,二者难以靠大小进行区分,因此,稀释的血液需要先进行溶血处理以破坏红细胞,红细胞的碎片远小于白细胞,这样在专门的WBC微孔中计数WBC的数目。RBC在被破坏的同时,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂反应形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长下比色,如氰化高铁法中形成氰化高铁血红蛋白,其最大吸收峰在540nm,吸光度的变化与液体中血红蛋白的含量成比例,由此即可测得血红蛋白的浓度。由于正常红细胞的浓度比白细胞高
8、出几百倍,因此,必须对检测白细胞的稀释液预先再次进行百倍稀释,又称为二次稀释。血细胞分析仪用另一个专用检测通道,吸入血细胞稀释液,并根据脉冲的高低对RBC和PLT分别计数,稀释的血液进入该红细胞检测通道时,其中含有白细胞,其数量影响可以忽略不计。细
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