叶绿体色素的提取的分离.doc

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1、江苏省泗阳中学课堂教学设计教、学案一体化　实验八　叶绿体中色素的提取和分离　备课老师：LHR实验八　叶绿体中色素的提取和分离一．实验原理：色素提取原理：利用相似相溶原理，色素可以溶解于酒精、丙酮等有机溶剂中，形成色素液。色素分离原理：　　　　由于四种色素在层析液的溶解度不同，因而四种色素在滤纸上的扩散速度也不同，从而将它们分离开来。二．实验材料：　　　　新鲜的绿色叶片、干燥的定性滤纸、烧杯、研砵、玻璃漏斗、尼龙布、毛细吸管、剪刀、小试管、培养皿盖、药勺、量筒、天平。　　　　药品：丙酮、层析液、二氧化硅、碳酸钙。三．实验过程：　　（一）。制备色素滤液：1．取叶：

2、称取5克新鲜的绿色植物叶片，然后剪碎，放入研砵中；2。研磨：A．研砵中分别加入以下物质：二氧化硅：为了使研磨充分；碳　酸钙：保护色素免受破坏；丙　　酮：作为色素的溶剂。思考题：（1）研磨时要使叶绿素能够提取出来，要破坏多少层膜？提示：应该是3层，一层细胞膜，两层叶绿体膜。（2）碳酸钙保护色素的原理是什么？因为叶绿素极易分解，在研磨过程中，细胞结构被破坏，细胞液中的有机酸释放出来，很容易破坏叶绿素分子，为了缓冲研磨液中的PH值一，可以加入碳酸钙，来中和释放出来的有机酸，从而避免了叶绿素被破坏。B．充分迅速地研磨；　　充分是为了彻底破坏细胞结构，迅速是为了防止丙酮

3、挥发；防止挥发采取的措施：在研砵上加一个中间有洞的纸，把玻璃棒插在中间研磨可以减少挥发。3．取滤液：在一支试管上插入一个小漏斗，中间用脱脂棉或者尼龙布作为过滤用，迅速倒入研磨滤液，进行过滤，然后在试管口用棉花塞紧。思考题：二○○一年十月十七日星期三　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第3页共3页江苏省泗阳中学课堂教学设计教、学案一体化　实验八　叶绿体中色素的提取和分离　备课老师：LHR为什么要迅速倒入？为什么要用棉花塞紧试管管口？　同样为了防止丙酮挥发；　同时由于色素极容易被光和空气所破坏，所以要避光和隔绝空气保存。（二）制备滤纸条：1。干燥处理

4、过的定性滤纸；思考　考为何干燥处理？有利于层析液在滤纸上的扩散；2．规格：6㎝×1㎝3．处理：在滤纸的一端，剪去两角，大约距1㎝处，角度约45°；思考　　　　　　　　　　　　剪角的目的是什么？　　　　　　　　　　　　因为在靠近两侧的层析液扩散的速度比较快，剪去两角后，扩大了两侧层析液扩散的距离，可以调整层析液扩散处于同一平面。(4).距1㎝处用铅笔画一条细线；作为将来画滤液细线的标记；不能用有机墨水笔来画，因为墨水会溶解于层析液中，而且有机墨水也会在滤纸上扩散。（三）画滤液细线：1．用毛细吸管吸取色素滤液，沿铅笔细线处画滤液细线；2．用力要均匀，细线要细、齐、

5、直；因为如果不细、齐，将来层析时会导致色素带的重叠；3．待滤液干后，再重复画二到三次；是为了增加滤液细线上色素的量，实验效果明显。（四）纸层析：1。层析液的量：大约是3ml，原则：烧杯中层析液的深度不得超过滤纸条上的滤液细线；2．插入滤纸条：有滤液细线的一端朝下，略微斜靠着烧杯内壁，轻轻地插入层析液中。注意：A．不能让滤纸条上的滤液细线触及到层析液;因为，色素同样可以溶解到层析液中；B．　用培养皿盖盖住烧杯口；为了防止层析液中的丙酮、苯等有毒物质挥发出来。使烧杯中的层析液蒸气处于饱和状态，有利于层析液的扩散。（五）观察结果：二○○一年十月十七日星期三　　　　　

6、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第3页共3页江苏省泗阳中学课堂教学设计教、学案一体化　实验八　叶绿体中色素的提取和分离　备课老师：LHR一般是从上到下来进行观察比较色素带，主要从以下几个方面，颜色、溶解度、分子式、扩散速度、含量等。名　　　称胡萝卜素叶黄素叶　绿　素a叶　绿　素b颜　　　色橙黄色黄色蓝绿色黄绿色溶　解　度最大较大大较小分　子　式C40H56C40H56O2C55H72O5N4MgC55H72O6N4Mg含　　　量最少较少　最多多相邻间距离叶黄素————叶绿素a————叶绿素b最大最小分　子　量最小最大扩　散速度最快最慢　　　　　　　　　

7、　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

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