游离脂肪酸测定方法

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1、游离脂肪酸检测（FattyAcidsContent）游离脂肪酸检测试剂盒(FFAAssayKit.KitcontentCuReagent,Colorreagentandstandard)实验准备1.抽提剂配制：自备氯仿、正庚烷、甲醇，按照体积（氯仿：正庚烷：甲醇=28：21：1）配制抽提剂200ml，4℃储存。2.标准品配制：精确称取82.06mg标准品(Palmiticacid，分子量=256.44)，溶于抽提剂中，终体积50ml，终浓度64mM，密封4℃保存。测定方案1.用抽提剂将64mM标准品新鲜稀释

2、为6.4、3.2、1.6、0.8、0.4、0.2、0.1mM。现用现配。2.取1.5mlAxygen进口离心管，加入50µl样品、标准品、空白对照。3.向管中加1.2ml抽提剂，盖紧盖子，悬涡混合器振荡30秒。4.加0.2ml铜试剂CuReagent，振荡30秒，各管混匀强度时间保持一致。5.室温放置20min。6.室温2000g离心5min。7.取1ml上层相转移到新离心管。8.向新管内加0.5ml显色试剂ColorReagent。混匀，室温孵育5min。9.用1-cm光径玻璃比色杯读取550nmOD值。

3、10.做标准曲线，计算FFA浓度。