用Universal-Buffer和Basal-Buffer进行限制酶活性表示.docx

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1、为了方便限制酶的统一使用，采用了通用缓冲液(UniversalBuffer)测定限制酶活性的体系(5种通用缓冲液中，用标注的)，以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的相对活性表示如下表。有()标记的是易受Star活性影响的缓冲液，为了避免Star活性的影响，希望尽量使用或标注的缓冲液。每种限制酶都有其自身的基本缓冲液(BasalBuffer)，其中AccⅢ、BalⅠ、BcnⅠ、BglⅠ、Bpu1102Ⅰ、Cfr10Ⅰ、Eam1105Ⅰ、Eco52Ⅰ、NruⅠ、PshBⅠ、SnaBⅠ、SspⅠ、TaqⅠ、Vp

2、aK11BⅠ(共14种)由于没有十分合适的通用缓冲液，只能使用基本缓冲液(BasalBuffer)。各种限制酶的基本缓冲液组成不同，相互之间不能通用。各种限制酶在基本缓冲液中的相对活性也被列于下表，供参考。限制酶在各种缓冲液中的相对活性附带·活性测定用Buffer推荐使用的Buffer*1+0.01%BSA→100%:AflII,Aor13HI,EcoO65I,FokI,Hin1I,MunI,NcoI,PvuI,Sse8387I,XbaI*2+0.01%BSA+0.01%TritonX-100→100%:NotI按Uni

3、versalBuffer分类的限制酶各UniversalBuffer的组成■使用注意事项10×Buffer都为10倍浓度的缓冲液。此外，10×T溶液中不含BSA，在使用时将BSA添加进去，使最终浓度为0.01%，有些限制酶(带有*1或*2标记)的反应体系中需加BSA或TritonX-100，添附的溶液是10倍浓度(0.1%)的液体，使用时，请在反应体系中添加1/10量进行反应。■保存-20℃反应停止液组份表(10×LoadingBuffer)1%SDS60%Glycerol0.05%BromophenolBlue■使用方

4、法本公司的酶包装中全部附带有反应停止液。使用时请添加反应液量的1/10，即可停止反应，进行电泳。-20℃保存时，会出现SDS沉淀，请于温水浴中溶解后使用。在室温下保存时，SDS有时也会出现沉淀，此时同样请于温水浴中将其溶解后使用。■保存开封后室温保存。