dna限制性内切酶——酶切buffer组分及其活性

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1、DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分及其活性TaKaRa公司，为了方便限制酶的统一使用，采用了通用缓冲液(UniversalBuffer)测定限制酶活性的体系(5种通用缓冲液中，用  标注的)，以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的相对活性表示如下表。有()标记的是易受Star活性影响的缓冲液，为了避免Star活性的影响，希望尽量使用  或  标注的缓冲液。每种限制酶都有其自身的基本缓冲液(BasalBuffer)，其中AccⅢ、BalⅠ、BcnⅠ、BglⅠ、Bpu1102Ⅰ、Cfr10Ⅰ、Eam1105Ⅰ、Eco52Ⅰ、NruⅠ、PshBⅠ、S

2、naBⅠ、SspⅠ、TaqⅠ、VpaK11BⅠ(共14种)由于没有十分合适的通用缓冲液，只能使用基本缓冲液(BasalBuffer)。各种限制酶的基本缓冲液组成不同，相互之间不能通用。各种限制酶在基本缓冲液中的相对活性也被列于下表，供参考。 限制酶在各种缓冲液中的相对活性  附带·活性测定用Buffer     推荐使用的Buffer *1 +0.01%BSA→100%: Afl II, Aor13HI, EcoO65I, Fok I, Hin1I, Mun I, Nco I, Pvu I, Sse8387I, Xba I *2 +0.01%BSA+0.01%Tri

3、tonX-100→100%: Not I*3 不加BSA 按UniversalBuffer分类的限制酶 各UniversalBuffer的组成  ■使用注意事项10×Buffer都为10倍浓度的缓冲液。此外，10×T溶液中不含BSA，在使用时将BSA添加进去，使最终浓度为0.01%，有些限制酶(带有*1或*2标记)的反应体系中需加BSA或TritonX-100，添附的溶液是10倍浓度(0.1%)的液体，使用时，请在反应体系中添加1/10量进行反应。 ■保存-20℃ 反应停止液组份表(10×LoadingBuffer)1%        SDS60%        G

4、lycerol0.05%        BromophenolBlue ■使用方法本公司的酶包装中全部附带有反应停止液。使用时请添加反应液量的1/10，即可停止反应，进行电泳。-20℃保存时，会出现SDS沉淀，请于温水浴中溶解后使用。在室温下保存时，SDS有时也会出现沉淀，此时同样请于温水浴中将其溶解后使用。■保存开封后室温保存。