平面色谱法学习指导(山西医科大学).pdf

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1、精品文档第十九章平面色谱法第一节内容和要求1．基本内容本章内容包括平面色谱分类；平面色谱参数：比移值和相对比移值、分配系数和保留因子、分离度和分离数，比移值与分配系数（保留因子）的关系；薄层色谱法的基本原理及类型，吸附薄层色谱中吸附剂和展开剂及其选择，薄层色谱操作步骤及定性定量分析；高效薄层色谱法；薄层扫描法；纸色谱法。2．基本要求本章要求掌握薄层色谱和纸色谱的基本原理，常用的固定相和流动相，比移值和相对比移值、分配系数和保留因子、分离度和分离数，比移值与分配系数（保留因子）的关系。吸附色谱中固定相和流动相的选择。熟悉平面色谱法分类，薄层

2、色谱中薄层板的种类，薄层色谱操作步骤，显色方法，影响薄层色谱比移值的因素，面效参数与分离参数，定性、定量分析方法。了解各种类型色谱的操作方法，薄层扫描法，高效薄层色谱法，应用与示例。第二节要点和难点（一）平面色谱的基本术语和公式1.定性参数：比移值（R）与相对比移值（R）frLRLRRf(i)(i)fLrRL0f(s)(s)2.R与分配系数（K）和保留因子（k）的关系f11RRf1KV/Vf1ksm3.面效参数：理论塔板数（n）与塔板高度（H）LLn16()2H0Wn4.分离参数：分离度（R）与分离数（SN）1欢迎下载。

3、精品文档2(LL)2dLR21SN01(WW)(WW)(W)(W)1212101122（二）主要平面色谱类型色谱类型分离原理载体固定相流动相R顺序f吸附薄层色谱吸附硅胶有机溶剂极性小的R值大f正相薄层色谱分配硅胶水有机溶剂极性小的R值大f反相薄层色谱分配硅胶硅胶键合相水-有机溶剂极性小的R值小f纸色谱分配滤纸水水-有机溶剂极性小的R值大f（三）吸附薄层色谱条件的选择被测组分的极性大，吸附剂的活度小，流动相极性大；被测组分的极性小，吸附剂的活度大，流动相极性小。1．被分离物质的极性与结构的关系（1）基本母核相同，基团极性愈大

4、，分子极性愈强；极性基团数目增加，分子极性增强。常见的取代基极性大小顺序：烷烃<烯烃<醚类<硝基化合物<二甲胺<脂类<酮类<醛类<硫醇<胺类<酰胺<醇类<酚类<羧酸类。（2）分子双键愈多，共轭度愈大，吸附性愈大。（3）空间排列影响极性，如能产生分子内氢键的分子极性下降。2．吸附剂的活度选择被分离物质的极性大，吸附剂活度要小，以免吸附太牢，不易洗脱；被分离物质的极性小，则吸附剂的活度要大，以免不被吸附，而无法分离。可改变活化温度和时间来控制吸附剂的活度。3．展开剂的极性单一溶剂的极性顺序：石油醚<环己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯、甲

5、苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<正丙醇<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水。4．混合溶剂选择的一般规则先用单一的中等极性展开剂试验，得出合适的极性。再改用二元展开剂，调节比例达到预期的极性，得2。欢迎下载精品文档到混合展开剂。目的是通过混合展开剂的极性和溶剂的强度，使各组分具有适宜的R值，从而达到良好的分离。f（四）分析方法1.定性分析（1）比移值R定性：与对照品的R值比较定性，但重现性差。ff（2）相对比移值R定性：与文献R值或对照品的R值比较定性。rrr2.杂质检查（1）杂质对照品比较法：配制一定浓度的试样溶液和规定限定浓度的杂质对照

6、品溶液，在同一板上展开，试样中杂质斑点颜色不得比杂质对照品斑点颜色深。（2）主成分自身对照法：首先配制一定浓度的供试品溶液，然后将其稀释一定倍数得到另一低浓度溶液，作为对照溶液。将试样溶液和对照溶液在同一板上展开，试样溶液中杂质斑点颜色不得比对照溶液主斑点颜色深。3.定量分析（1）洗脱法（2）直接定量法：目视比较法和薄层扫描法。第三节精选例题1．试推测下列化合物在硅胶薄层板上，以石油醚-苯（4:1）为流动相展开时的R值次序，并说明理由。fNNNNOCH3偶氮苯对甲氧基偶氮苯3欢迎下载。精品文档HOHONNNNNN苏丹黄苏丹红NNNHNNO

7、H2对氨基偶氮苯对羟基偶氮苯答：根据组分在吸附色谱薄层板上展开的机理，组分的极性越大，R越小；组分的极性越小，R越大。六种化合物的分子结构均含有偶ff氮苯母核，根据取代基的极性便可排列出六种化合物的极性顺序。苏丹红、苏丹黄及对羟基偶氮苯均带有羟基官能团，他们的极性较强。但苏丹红、苏丹黄上的羟基H易与相邻氮原子形成分子内氢键，而使它们的极性大大下降，致使其极性小于对氨基偶氮苯。苏丹红极性大于苏丹黄，是因为苏丹红的共轭体系比苏丹黄长。所以六种化合物的极性次序为：偶氮苯<对甲氧基偶氮苯<苏丹黄<苏丹红<对氨基偶氮苯<对羟基偶氮苯；可推测R值次序

8、为：偶氮苯>对甲氧基偶氮苯>苏f丹黄>苏丹红>对氨基偶氮苯>对羟基偶氮苯。2．吸附薄层色谱中，欲使被分离极性组分R值变小，一般可采f用哪些方法？答：（1）增加吸附剂的活度在薄层活化时，适当提高