移液管和可调式移液器的使用与误差分析课件.ppt

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1、刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与数据处理（Volumetransfer,accuracyandprecision）李志红生物化学基本实验技能训练（一）Dept.ofbiochemistry实验目的了解生物化学实验室规章制度和实验要求掌握刻度吸管的分类和使用方法，达到稳、捷、准掌握微量可调式移液器的原理和使用方法，了解可调式移液器的校正方法建立实验误差、准确度和精确度的概念，掌握误差分析计算方法了解电子天平的使用方法生化实验室规章制度和实验要求1.必须按教学计划规定的时间到实验室，不迟到，不早退。进入实验室必须穿实

2、验服。2.保持环境的肃静和整洁，不高声说话，严禁用器械及动物开玩笑。3.严格按操作规程使用仪器，凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用。仪器发生故障、损坏、丢失时，应立即报告老师，凡违反操作规程而损坏仪器者，要追究责任。4.实验过程中要大胆、细心，认真观察实验现象并记录好原始数据；节约试剂，节约水电。5.实验完毕，洗净所用器材，固体舍弃物(如用过的滤纸、电泳用凝胶条等)切勿倒入水槽内，以免堵塞。须经指导教师同意，方能离开实验室。6.值日生负责实验室卫生，倒尽垃圾，关好水、电、门窗，经教师检查后方可离开。试剂使用1.仔细辨认标

3、签，确定所需试剂及浓度。2.吸量管与所需试剂号码务必对准。3.用后盖好瓶盖(切勿张冠李戴)归还原处，以免影响他人使用。实验考核生化总成绩理论考试卷面成绩(60%)实验成绩(30%)平时成绩(10%)实验成绩平时实验成绩(60%)实验考试成绩(40%)平时实验成绩三部分：考勤(20%)+实验操作(40%)+实验报告(40%)考勤：迟到，扣10分；旷课，本次实验成绩为0分操作：不穿白大褂扣10分，不带实验教材扣10分。没有预先预习实验扣10分。实验操作不规范扣5分；过失造成玻璃器皿损坏扣5分；过失造成仪器损坏扣10分。没有清

4、洗玻璃器皿和还原仪器原状扣10分。没做清洁扣10分。实验报告的书写实验报告没有实验目的扣5分没有实验原理扣5分没有实验过程扣10分，尽可能用图、表来表示涂改实验数据扣20分。没有分析与实验讨论（或者思考题）扣15分没有报告临床意义扣5分态度（书写、条理、通顺）预习报告（每次实验课前检查）实验目的、原理、试剂、操作步骤和临床意义本学期实验内容1刻度吸管、可调式移液器的校正与误差分析2分光光度法测定物质的浓度3血清总蛋白和白/球比值的测定4酶的竞争性抑制5血红蛋白与核黄素的凝胶层析分离6血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳7血清碱性磷

5、酸酶活性测定8血糖测定9质粒DNA的提取10DNA的琼脂糖凝胶电泳分析11血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性测定12直接胆红素与总胆红素测定13实验考试生物化学课程网站访问路径：“三峡大学”-“求索学堂”-“课程总揽”-“医学院”-“医用生物化学”网站内有理论课和实验课的教学大纲、ppt，习题集，考试方法和考试样卷等，同学们可根据需要下载学习刻度吸管和微量可调式移液器的使用、校正与误差分析问题：将一定量的溶液从一容器转移到另一个容器。用什么量具？是否精准？一、刻度吸管(pipette)的分类和操作方法分类：10ml,5m

6、l,2ml,1ml,0.5ml,0.2ml,0.1ml（吹?）移液管吸量管刻度吸管的操作方法1．使用前：首先要看刻度吸管标记、刻度标线位置等。2．吸液：用右手的拇指和中指捏住刻度吸管的上端，将管的下口插入欲吸取的溶液中；左手拿洗耳球，将洗耳球内空气排出，接在管的上口把溶液慢慢吸入至刻度以上，立即用右手的食指按住管口。3．调节液面：将刻度吸管向上提升离开液面，略为放松食指（有时可微微转动吸管）使管内溶液慢慢从下口流出，直至溶液的弯月面底部与标线相切为止（看刻度时，应将刻度吸管的刻度与眼睛平行），立即用食指压紧管口。将尖端的

7、液滴靠壁去掉，移出刻度吸管，插入承接溶液的器皿中。4．放出溶液：刻度吸管下端紧靠锥形瓶内壁，稍松开食指，让溶液沿瓶壁慢慢流下，流完后管尖端接触瓶内壁停留数秒后，再将刻度吸管移去；若刻度吸管上标有“吹”，则需将管内残余液体吹出。法国GILSON芬兰Labsystems日本NICHIRYO美国TOMOS德国Brand德国Eppendorf美国JENCONS芬兰雷勃Finnpipette工欲善其事，必先利其器二、微量可调式移液器（micropipette,俗称“加样枪”）的构造和使用方法微量可调式移液器的规格用途规格：5ml移

8、液器(1000-5000ul)1ml移液器(200-1000)200ul移液器(20-200)100ul移液器(20-100ul)10ul移液器(0.5-10ul)2ul移液器(0.1-2ul)移液器及配套吸嘴（俗称枪头，tip）0.5-20µl20-200µl100-1000µl1.5ml0.2ml2ml移液器常用