实验四 斐林试剂法法测定还原糖含量(1).doc

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1、实验四斐林试剂法测定果品蔬菜中还原糖含量一、实验目的：掌握园艺产品中糖的测定方法。二、实验原理利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。三、试剂与材料1、斐林试剂甲：69.3gCuSO4.5H2O加水溶解并定容至1000ml；乙：346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml；2、1%次甲基蓝，1g次甲基蓝

2、加水溶解并定容至100ml，棕色瓶保存；3、0.2%标准葡萄糖，2g105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml；4、碱式滴定管；5、电炉，各种玻璃器皿。四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升（约23ml）。（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5－1.0ml)。电炉上加热至沸，并保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。记录耗用的葡萄糖量为V0，必须在

3、1min内完成。（注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。）2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%葡萄糖滴定至蓝色消失。记录耗用的葡萄糖量为V1。3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释)，补加（V0-V1）ml水，并从滴定管中预先加入（V1-1）ml0.2%葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min微沸，加入2滴1%次甲基蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升

4、。五、结果计算还原糖含量(以葡萄糖计)（g/ml)=（Vo-V)×0.002×1/10×n式中：Vo--------斐林试剂标定值，mlV---------样品糖液测定值，ml0.002-----标准葡萄糖溶液浓度，g/ml10--------样品糖液体积，mln---------样品稀释倍数六、思考题：1、还原糖测定方法有哪些？2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项？亲爱的用户：烟雨江南，画屏如展。在那桃花盛开的地方，在这醉人芬芳的季节，愿你生活像春天一样阳光，心情像桃花一样美丽，感谢你的阅读。1、最困难的事就是认识自己。21.7.317.31.202103

5、:0203:02:23七月-2103:022、自知之明是最难得的知识。二〇二一年七月三十一日2021年7月31日星期六3、越是无能的人，越喜欢挑剔别人。03:027.31.202103:027.31.202103:0203:02:237.31.202103:027.31.20214、与肝胆人共事，无字句处读书。7.31.20217.31.202103:0203:0203:02:2303:02:235、三军可夺帅也。星期六,七月31,2021七月21星期六,七月31,20217/31/20216、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。3时2分3时2分31-七

6、月-217.31.20217、人生就是学校。21.7.3121.7.3121.7.31。2021年7月31日星期六二〇二一年七月三十一日8、你让爱生命吗，那么不要浪费时间。03:0203:02:237.31.2021星期六,七月31,2021