[医学]离体蛙心灌流(20141229)课件.ppt

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1、离体蛙心灌流(20141229)实验内容1.实验目的与原理2.实验材料3.实验方法4.注意事项探索、求知、明理Experimentisfatherofscience实验目的掌握:1.观察各种理化因素对心脏活动的影响。掌握:1.离体蛙心标本的制备。2.离体蛙心灌流的方法。熟悉:1.张力生物信号采集与处理系统的使用。了解:1.离体器官的研究方法。理论操作探索、求知、明理Experimentisfatherofscience实验原理探索、求知、明理Experimentisfatherofscience心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行,一旦适宜的环

2、境被破坏,心脏的活动就会受到影响。在整体内,心脏的活动受自主神经的双重支配,交感神经兴奋时,其末梢释放去甲肾上腺素,使心肌收缩力增强,心率增加;迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力量减弱,心率减慢。青蛙心脏离体后,用理化特性近似于血浆的任氏液灌流,在一定时间内,可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。改变任氏液的组成成分,如改变Na+、K+、Ca2+的浓度及酸、碱度等,心脏活动的频率和幅度就会发生相应的改变。实验材料探索、求知、明理Experimentisfatherofscience实验动物试剂和药品装置和器材青蛙任氏液RM6240生物信号采集

3、与处理系统、张力换能器、蛙类手术器械、蛙心插管,蛙心夹、滑轮、双凹夹等。蛙心插管蛙心夹实验方法探索、求知、明理Experimentisfatherofscience1.标本制备(制备离体蛙心标本)实验方法探索、求知、明理Experimentisfatherofscience2.安装实验装置用试管夹将蛙心插管固定在铁支架上,将蛙心夹夹住心尖,所连着的线通过滑轮连接在张力换能器上。实验方法探索、求知、明理Experimentisfatherofscience3.进行实验启动软件,选取相应的实验项目,调节实验参数。实验方法探索、求知、明理Experimenti

4、sfatherofscience4.观察项目⑴描记正常心脏收缩曲线:曲线幅度代表心室收缩强弱,单位时间内的曲线个数代表心跳频率及其规律性。曲线向上移动表示心室收缩,其顶点水平代表心室收缩所达到的最大程度;曲线向下移动表示心室舒张,其最低点即基线水平代表心室舒张的最大程度;调节微调,使心脏舒张期张力至0.3g。⑶待曲线稳定后,加入1~2滴KCl溶液于任氏液中,观察心搏曲线变化;⑷加入1~2滴2%CaCl2于任氏液中,观察心搏曲线变化;⑵缺Ca2+、K+:吸出插管内全部任氏液,换入0.65%NaCl,观察心搏曲线变化;实验方法探索、求知、明理Experime

5、ntisfatherofscience4.观察项目⑸加入1滴1:1000去甲肾上腺素,观察心搏曲线变化;⑺加入1滴3%乳酸,观察心搏曲线的变化,效应出现后,加入1滴2.5%NaHCO3,再观察心搏曲线的变化,至心搏曲线基本恢复时,再用新鲜任氏液反复冲洗直至心搏曲线恢复正常;⑻对所记录和储存的数据进行分析,撰写实验报告。⑹加入1滴1:10000的乙酰胆碱,观察心搏曲线变化;注意事项探索、求知、明理Experimentisfatherofscience标本制作⑴尽量避免手术和器械碰触心;⑵结扎静脉时,勿扎住静脉窦;⑶要选择尖端光滑的蛙心插管,插管时避免损伤动

6、脉和心肌;⑷插入蛙心插管后立刻用任氏反复换洗,待插管内的液体变成完全澄清为止;⑸用任氏液换洗时不要让空气进入心。⑹连接蛙心夹和张力换能器的棉线松紧度要合适。注意事项探索、求知、明理Experimentisfatherofscience实验过程⑴从第二观察项目开始,每个实验都应该有前后对照;⑵加入药物时,先加入1~2滴,如果作用不明显再补加,不可一次加入太多药物,以免损伤心肌;⑶做每项实验时,都要在实验记录上做标记,以免混淆;⑷随时滴加任氏液于心脏表面使其保持湿;⑸当每种化学药物(尤其是抑制心脏活动的药物)作用已明显时,应立即换洗,以免心肌受损。待心跳恢复

7、后再进行下一个实验。⑹每项实验时均应保持套管内的液面在相同高。ThankYou!细心观察,认真分析,科学总结Carefulobservation,seriouslyanalysisandscientificsummary

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