分析化学8 吸光光度法.ppt

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1、第八章吸光光度法第一节吸光光度法基本原理第二节光度计及其基本部件第三节显色反应及显色条件的选择第四节吸光度测量条件的选择第五节吸光光度法的应用第六节紫外吸收光谱法简介10吸光光度法概述吸光光度法（AbsorptionPhotometry）是一种基于物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法。包括可见吸光光度法、紫外吸光光度法和红外光谱法等。吸光光度法同滴定分析法、重量分析法相比，有以下一些特点：(一)灵敏度高吸光光度法测定物质的浓度下限(最低浓度)一般可达10-5的微量组分。对固体试样一般可测到

2、10-4。如果对被测组分事先加以富集，灵敏度还可以提高1-2个数量级。10吸光光度法续前(二)准确度较高一般吸光光度法的相对误差为2-5%，其准确度虽不如滴定分析法及重量法，但对微量成分来说，还是比较满意的，因为在这种情况下，滴定分析法和重量法也不够准确了，甚至无法进行测定。(三)操作简便，测定速度快(四)应用广泛几乎所有的无机离子和有机化合物都可直接或间接地用吸光光度法进行测定。10吸光光度法吸光分析的几种方法目视比色法标准系列未知样品特点利用自然光比较吸收光的互补色光准确度低（半定量）不可分辨

3、多组分方法简便，灵敏度高10吸光光度法分光光度法（紫外-可见分光光度法）UV-VIS0.575光源单色器吸收池检测器显示I0It参比样品入射光I0透射光It请注意与定义比较未考虑吸收池和溶剂对光子的作用10吸光光度法第一节吸光光度法基本原理一、物质对光的选择性吸收二、光的吸收基本定律——朗伯-比尔定律三、偏离比尔定律的原因10吸光光度法一、物质对光的选择性吸收1.光是一种电磁波不同波长的光具有不同的能量E＝h=hc/人眼只能感受到可见光区域的光，只占整个电磁波谱中很小的一部分。波长范围在400

4、~760nm。不同波长的可见光引起人不同的视觉效果，因而产生不同的颜色。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理续前10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理2.互补色光如果将两种适当颜色的可见光按一定比例混合能得到白色光，则具有此性质的两种光称为互补色光。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理单色光、复合光、光的互补单色光复合光光的互补单一波长的光由不同波长的光组合而成的光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光，那么就称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。蓝黄紫红绿紫黄绿绿

5、蓝橙红蓝绿10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理3.吸光条件CuSO4水溶液为什么只选择性的吸收自然光中的黄色光，而不吸收其它颜色的光哪？原因：与物质分子内部的结构有关物质分子内部都具有一系列不连续的特征能级（量子化），接受能量后可以发生能级之间的跃迁。由外层电子跃迁得到的光谱为紫外-可见光谱。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理续前电子能级间跃迁电子能级间跃迁的同时总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。10吸光光度法10.1

6、吸光光度法基本原理续前物质分子外层电子平时处于能量最低、最稳定的基态，当用光照射到物质后，如果光具有的能量恰好和电子由基态跃迁到激发态所需要的能量相等时，则这一波长的光就被分子所吸收，发生电子跃迁。M+热M+荧光或磷光M+hM*基态激发态E1（△E）E2E=E2-E1=h不同分子的组成和结构都不同，所具有的特征能级（E）也不同，因此对不同波长光的吸收程度不同，特定的分子只选择性吸收特定波长的光。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理4吸收曲线与最大吸收波长采用不同波长的单色光照射某一吸

7、光物质，并测量每一个波长下该物质对光吸收程度的大小（吸光度），以波长（λ）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘图，得到的曲线为吸收曲线（吸收光谱）吸收光谱准确地描述了物质对不同波长的光的吸收情况。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理吸收曲线的讨论：（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax（2）同一种物质，浓度不同，其吸收曲线形状相似，λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理续前（3）

8、同一种物质，浓度不同，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。动画（4）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。10吸光光度法10.1吸光光度法基本原理二、光的吸收基本定律——朗伯-比尔定律透光度当一束强度为I0的平行单色光通过任何均匀的非散射溶液时，一部分光被介质中的吸光分子吸收，另一部分光透过溶液后，强度降低为It，It与I0之比称为透光度T=It/I0溶液的透光度