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时间:2021-04-16
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1、分析化学吸光光度法7.1:概述一、吸光光度法基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。许多物质呈现颜色,而且颜色深浅与浓度有关二、方法特点:1、灵敏度高,能测<1.0%----ppb级,微量级痕量组分;2、准确度较高;3、简便,快速,应用广泛.2021/8/22二、电磁波谱射线x射线紫外光红外光微波无线电波10-2nm10nm102nm104nm0.1cm10cm103cm105cm可见光2021/8/231、分子吸收光谱:将不同波长的单色光依次通过某一固定浓度的有色溶液,测量每一波长下,有色溶液对光吸收的强度(A),作A--λ曲线图,得到吸收光
2、谱。2021/8/27由于分子结构不同,分子运动形式不同,运动所需能量不同,而吸收不同能量的光,分子的能级是量子化的,因而吸收的光子的能量也是不连续的。2021/8/28(1)同一物质对不同波长的光的吸收强度不同,如KMnO4对400nm吸收少,对525nm吸收最大,称λmax(2)同一物质浓度一定时,在某波长下吸收强度一定,浓度不同吸收强度不同,c愈大,A愈大,c3>c2>c1是光谱定量的依据(3)同一物质分子运动的形式相同,结构相同,在不同浓度下,吸收曲线的形状相同,且λmax位置不变(4)不同物质的吸收曲线形状不同,决定了物质的结构分析的依据202
3、1/8/29(5)若选择在λmax处测量A,则灵敏度高Cr2O72-MnO4-2、物质的颜色2021/8/210溶液呈现的颜色与吸收光颜色及波段的关系物质的颜色吸收光颜色波长范围(l,nm)黄绿黄橙红紫红紫蓝绿蓝蓝绿紫蓝绿蓝蓝绿绿黄绿黄橙红400-450450-480480-490490-500500-560560-580580-600600-650650-750溶液呈现的颜色是其吸收光的互补光的颜色。2021/8/2117.2:光吸收定律一、朗伯-----比耳定律当一束强度为I0的平行单色光入射到厚度为b的溶液上,一部分光被吸收(强度为Ia),剩余的光
4、透过(强度为It)透光率吸光度2021/8/212当物质对光完全透光时,T=1,A=0当物质对光全部吸收时,T=0,A=∞朗伯-比尔定律的数学表达式I0IrItIa单色光垂直照射含有吸光物质的溶液时,溶液的吸光度与吸光物质的浓度及液层的厚度成正比。2021/8/213其中,A:吸光度,T:透射比,K:比例常数,b:溶液厚度,c:溶液浓度注意:平行单色光均相介质无发射、散射或光化学反应二、吸光系数、摩尔吸光系数1、吸光系数a和摩尔吸光系数ε(Molarabsorptivity)A=K·b·c(1)当c=g/L时:b=cm;K=a=L·g-1·cm-1(2)
5、当c=mol/L时:b=cm;K=ε=L·mol-1·cm-12021/8/214ε表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时溶液的吸光度。单位:(L•mol-1•cm-1)影响ε值大小的因素(1)入射光波长(2)与被测物质有关(3)温度,酸度,介质,有色物结构,(4)ε不随c或b值变化2021/8/2152、桑德尔(Sandell)灵敏度:S当仪器检测吸光度为0.001时,单位截面积光程内所能检测到的吸光物质的最低含量。单位:μg/cm2氯磺酚S测定钢中的铌50ml容量瓶中有Nb30μg,用2cm比色池,在650nm测定光吸收,A=0.43,求ε
6、(Nb原子量92.91)。2021/8/216三、吸光度A的加和性若溶液中含有不止一种吸光物质,则总吸光度等于各个组分吸光度之和:A=A1+A2+......+An=ε1bc1+ε2bc2+......+εnbcn2021/8/2177.3分光光度计0.575光源单色器吸收池检测器显示2021/8/2181、光源(Source):75W钨灯,发射出360--800nm波长的连续光谱2、单色器(Monochromator):将连续光谱分解为按波长排列的单色光3、比色皿(吸收池):材质相同的玻璃,石英制成0.5,1.0,2.0,3.0cm4、检测器(Dete
7、ctor):接受比色皿透过的光强,转换为电信号,并放大显示,读取T,A,c光电管:产生光电流,在电阻两端产生电压降2021/8/2197.4显色反应及影响因素一、显色反应没有颜色的或颜色较浅的化合物,需要通过适当的反应定量生成有色化合物再测定-显色反应。被测物显色剂有色化合物对显色反应的要求:1、选择性好2、灵敏度高(ε>104)2021/8/2203、产物的化学组成稳定4、化学性质稳定5、显色剂和产物有明显的颜色差别(λ>60nm)二、显色剂1、无机显色剂:过氧化氢,硫氰酸铵,碘化钾2、有机显色剂:(1)偶氮类:偶氮胂III2021/8/221(2)
8、三苯甲烷类三苯甲烷酸性染料铬天菁S(3)邻菲罗啉类:新亚铜灵2021/8/222
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