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时间:2020-08-10
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1、实验前:资料准备多查文献,查足文献国外为主,掌握动态国内为辅,词汇学习成竹在胸实验前:实验技术准备勤学好问,不耻上问——多向已掌握该技术的人学习和请教书山有路勤为径——多认真阅读经典的实验技术指南,如《分子克隆实验指南》实验前:实验技术准备前人栽树,后人乘凉——查找相关文献查找PCR引物(注意核对序列)查找核酸探针序列(AP-1)查找实验步骤(EMSA)实验前:实验设计:磨刀不误砍柴功实验组、对照组设置完整合理实验前:实验设计绘出实验加样草图,具体到每个孔加什么、何时加、加多少实验中:预实验同一批次小鼠,先每组选
2、择2-3只摸索致死剂量不同批次的试剂随机化原则实验结果稳定的保证不等于随便和随手抓实验中:该繁则繁抽提RNA时戴手套该简则简无须无菌操作的步骤无需防止RNA酶污染的步骤实验中:该快则快开始调节pH值该慢则慢细胞培养时的无菌操作RT-PCR时的加样实验中:出现加样错误时及时弥补(如调换加样孔)做好记录充分利用好时间实验间隙写实验记录实验中:注意自我防护细菌致癌物质:EB、DEPC辐射:γ-32P具有腐蚀作用的试剂:强酸有毒物质:丙烯酰胺实验后:及时记录,防止遗忘(好记性不如烂笔头)及时总结,不要盲目向下进行(欲速则
3、不达)调整实验思路更换细胞(THP-1、U937、PBMC)重新配试剂(EMSA溶液A、乙酸铵)实验后:向高手请教和复习文献资料(三人行,必有我师)相信自己的实验结果鼠CpG-NODN→人CpG-SODN抗TLR9抗体并不减少CpG-SODN诱导的TNF-a释放谢谢!
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