幽门螺杆菌以及临床检验方法.doc

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1、幽门螺杆菌以及临床检验方法　　【摘要】幽门螺杆菌，简称Hp，是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌。长2.5～4.0μm，宽0.5～1.0μm。在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。被幽门螺杆菌感染的患者常出现下列症状：反酸、烧心以及胃痛、口臭，或者引起慢性胃炎。本研究即和大家探讨一下幽门螺杆菌以及其临床检验方法。　　【关键词】幽门螺杆菌临床检验　　【中图分类号】R573.3【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）05-0242-01　　自1983年分离出幽门螺杆菌（Hp）以来，目前认为

2、Hp与消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌及粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的发生密切相关。所以Hp感染的准确诊断在临床工作中显得尤其重要。目前Hp感染的诊断方法分为内窥镜依赖性检查方法和非内窥镜依赖性检查方法，但每种检查方法各有优点及不足。　　1幽门螺杆菌的介绍　　电子显微镜下，菌体的一端可伸出2～6条带鞘的鞭毛。在分裂时，两端均可见鞭毛。鞭毛长约为菌体1～1.5倍。粗约为30nm。鞭毛的顶端有时可见一球状物，实为鞘的延伸物。每一鞭毛根部均可见一个圆球状根基伸入菌体顶端细胞壁内侧。在其内侧尚有一电子密度降低区域。鞭毛在运动中起推进器作用

3、，在定居过程中起抛锚作用。许多固体培养基可作幽门螺杆菌分离培养的基础培养基，布氏琼脂使用较多，但需加用适量全血或胎牛血清作为补充物方能生长。在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状。Hp是微需氧菌，环境氧要求5～8%，在大气或绝对厌氧环境下不能生长。许多固体培养基可作Hp分离培养的基础培养基，布氏琼脂使用较多，但需加用适量全血或胎牛血清作为补充物方能生长。常以万古霉素、TMP、两性霉素B等组成抑菌剂防止杂菌生长。　　2幽门螺杆菌的检验方法　　幽门螺旋杆菌感

4、染的检查方法很多，主要包括细菌的直接检查、尿毒酶活性测定、免疫学检测等方法。　　2.1.直接检查细菌　　指通过胃镜检查钳取胃粘膜（多为胃窦粘膜）作直接涂片、染色，组织切片染色及细菌培养来检测幽门螺旋杆菌。其中胃粘膜细菌培养是诊断幽门螺旋杆菌最可靠的方法，可作为验证其他诊断性试验的“金标准”，同时又能进行药敏试验，指导临床选用药物　　2.2.检查尿毒酶　　根据抗原-抗体杂交免疫法原理，因为幽门螺旋杆菌是人胃内唯一能够产生大量尿毒酶的细菌，故可通过检测尿毒酶来诊断幽门螺旋杆菌感染。尿毒酶分解胃内尿毒生成氨和二氧化碳，使尿素

5、浓度降低、氨浓度升高。基于此原理已发展了多种检测方法：胃活检组织尿毒酶试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适pH为7.0。试验方法是挑取18～24h待试菌培养物大量接种于液体培养基管中，摇均，于36±1℃培养10，60和120min，分别观察结果。或涂布并穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照。培养2，4和24h分别观察结果，如阴性应继续培养至4天，作最终判定，变为粉红色为阳性。呼吸试

6、验：呼气试验是进行呼吸肌张力、呼气流速、重复呼吸试验进行的并根据试验结果判断是否有呼吸系统病变的检查方法。胃液尿素或尿素氮测定：血尿素氮------肾功能主要指标之一。所以尿素氮的变化对非蛋白氮数值的影响较大。临床上常选用尿素氮的检测来代替非蛋白氮的测定。尿素测定是检查胃有无幽门螺杆菌（helicobacterpylori，Hp）。胃液中尿素酶是细菌代谢产物，而非胃黏膜本身所固有。幽门螺杆菌是人胃内惟一产生大量尿素的细菌。目前已发现Hp脂多糖、尿素酶、空泡毒素与黏附素等是重要的定植致病因子，Hp的提取物可以引起胃黏膜细

7、胞DNA的损伤。　　2.3.免疫学方法检测　　幽门螺杆菌免疫学检查是通过测定血清中的幽门螺旋杆菌抗体来检测幽门螺旋杆菌感染，包括补被动血凝测定、免疫印迹技术和酶联合吸附测定（ELISA）等。幽门螺旋杆菌抗体检测是利用胶体金技术定性检测人血清、血浆或全血中抗胃幽门螺旋杆菌抗体。免疫学检测的过程为：一被动血凝测定患者刺取脑脊液，采用稀释抗原固定血清法用96孔V型微量血凝板，将乙脑抗原作倍比稀释，使每孔含25uL，被检血清用稀释液作1：10稀释，每孔加人25uL产，再滴加冻干乙脑单克隆抗体致敏羊血红细胞25uL，37℃下放置

8、数小时后观察结果。　　3如何预防感染幽门螺杆菌　　幽门螺旋杆菌患者平时应注意饮食定时定量，营养丰富，食物软烂易消化，少量多餐，细嚼慢咽；忌过饱，忌生冷酸辣、油炸刺激的食物，忌烟熏、腌制食物。含亚硝胺的腌制食品等也具有致癌作用，加上幽门螺杆菌阳性的作用，就会增加癌变的几率。　　3.1.改变用餐方式　　亚洲人使用筷子在一个大碗里吃菜的