行业标准：GB-T14701-2002 饲料中维生素B2的测定.pdf

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1、ics65-120B46石日中华人民共和国国家标准cB/T14701-2002代替(;B/T14701-1993饲料中维生素B:的测定DeterminationofvitaminB2infeeds2002一10一31发布2003一04一01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局GB/T14701-2002月U胃本标准修订了GB/T14701-1993《饲料中维生素B:的测定》，修订后的方法具有适用范围广、检测限低、高效、快捷、准确的特点本标准参考了美国“化学分析协会”第六十七期发表的《复合预混料中抗坏血酸、烟酸胺、毗哆醇、硫胺素及核黄素的液相色谱分析方法》和美

2、国公职分析化学家协会(199。版)《食物和维生素制品中的核黄素荧光测定法》而制定。本标准与GB/T14701-1993的主要技术差异:标准规定了两种方法，方法1为荧光分光光度法，保留GB/T14701-1993的全部内容，在范围中补充了复合预混合饲料，将重复性允许差“相对相差”改为“相对偏差”;方法2为高效液相色谱法，确定了试样的提取条件、色谱条件及重复性要求，并确定了该法适用于维生素B:含量大于10mg/kg的复合预混合饲料及维生素预混合饲料。本标准规定了荧光分光光度法为仲裁法。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位:国家饲料质量监督检验中心

3、(北京)本标准主要起草人:李兰、陈必芳。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T14701-1993.GB/T14701-2002饲料中维生素B2的测定范围本标准规定了用荧光分光光度仪和高效液相色谱仪测定饲料中维生素B:含量的两种方法。本标准规定的方法1适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中的维生素B,的测定。待测液中维生素Bz检测浓度为。.05pg/mL-0.2pg/mLo本标准规定的方法2适用于维生素B:含量大于10mg/kg的复合预混合饲料、维生素预混合饲料中维生素B，的测定。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用

4、而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样方法方法1:荧光分光光度法(仲裁法)11原理维生素B(即核黄素C,HaoN,Oa)在440nm紫外光激发下产生绿色荧光，在一定浓度范围内其荧光强度与核黄素含量成正比。用连二亚硫酸钠还原核黄素成无荧光物质，由还原前后荧光强度之差与内标荧光强度的比值计算样品核黄素的含量。3.2试剂

5、和溶液除非另有说明，所用试剂均为分析纯的试剂，水为蒸馏水，符合GB/T6682中3级用水或相当纯度的水。3.2.1氢氧化钠溶液，c(NaOH)=0.05mol/L.3.2.2氢氧化钠溶液，c(NaOH)一1.0mol/Lo3.2.3盐酸溶液，c(HCI)=0.1mol/L,3.2.4盐酸溶液，c(HCl)=1.0mol/Lo3.2.5连二亚硫酸钠(Na2Sz0,)(保险粉)，防止吸潮。3.2.6高锰酸钾溶液，40g/LoI2.了冰乙酸。3.2.8冰乙酸溶液，c(CH,COOH)=0.02mol/L:将1.8ml冰乙酸用水稀释至1000mLo3.2.9过氧化氢溶液,10

6、0mL/I，现用现配。3.2-10维生素B:标准溶液:3.2-10.1维生素B:储备液工:核黄素纯品(中国药典参照标准)于五氧化二磷干燥器中干燥24h,溶解于冰乙酸溶液(3-2-8)中，在蒸气浴上恒速搅动直至溶解，冷却后稀释至500mL。盛人棕色瓶滴加甲苯覆盖，冰箱4C保存，保存期6个月。该溶液含0.1mg/m工维生素Bie3.2.10.2维生素B:贮备液l:取维生素B贮备液「(3-2.10.1)10mL用冰乙酸溶液(3-2-8)稀释至100mL,盛于棕色瓶中滴加甲苯覆盖，冰箱4C保存，保存期3个月，该溶液中含10pg/mL维生素BioIGB/T14701-20023

7、.2-10.3维生素B:标准工作液:取维生素B,贮备液1(3.2.10.2)10ml，用水稀释至100mL，现用现配。该溶液中含1pg/ml一维生素B,o3.2门1荧光素标准溶液:3.2.11.1荧光素贮备液:称取荧光素。.050g，用水稀释至1000mL,盛于棕色瓶中冰箱4C保存。该溶液中含50pg/mL荧光素。3.2.11.2荧光素标准工作液:取1ml荧光素贮备液(3.2.11.1)，用水定容至1000MI，盛人棕色瓶中，低温保存。该溶液每毫升中含。.05pg荧光素3.2-12嗅甲酚绿pH指示剂取澳甲酚绿0.1g，加氢氧化钠溶液(3-2.1)2.