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时间:2020-07-31
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1、题目:如何进行一个完整的DNA重组技术,实现从DNA到蛋白质?选取自己感兴趣的基因,利用目前所学知识设计一套完整的实验方案提示:可以从以下几个方面考虑利用GenBank查找基因序列;PCR扩增该基因;测序,确认;构建表达载体;蛋白质的诱导表达;目的蛋白的鉴定、分离及纯化。生物信息学分析:搜索序列(直接输入关键词、登陆号或进行同源搜索)→查找开放式阅读框架(ORF)→引物设计(需要引入酶切位点,需考虑ORF的酶切位点、表达载体CMS的酶切位点等因素)基因克隆:↓RT-PCR扩增目的基因↓测序确认原核(真核)表达技术:↓重组表达载体的构建;↓转入E.coli或yeast
2、中;↓目的蛋白的诱导表达及分离纯化
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