中国药典版--薄层色谱讲义课件.ppt

《中国药典版--薄层色谱讲义课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、薄层色谱法第一节　概　述第二节薄层色谱的基本技术第三节影响薄层色谱分析的主要因素第一节概述薄层色谱法是kirchner等人在五十年代从经典柱色谱法及纸色谱的基础上发展起来的一种色谱技术。薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离快速、灵敏度及分辨率高、显色剂选择性大，以及制备薄层载量较纸色谱大，而切割色带较柱色谱方便等优点。并且在2010版药典中应用的更加广泛项目类别鉴别检查特征或指纹图谱含量测定显微TLCHPLCGC理化通则重金属有害元素毒性成分其他HPLCTLCSUVGC其他中成药10版　新增259181825954426832162670

2、912824105版收载281114411161026278109013213316194提取物10版新增21325111501617705版收载161710121569115中药材10版新增3745263226112712143141231793405版收载33934751797261717711751320730合计10版新增63324923112134155431402432211381525163205版收载6201507161629813633728217150547373134增修订项目操作方法薄层色谱就是将吸附剂均匀地铺在玻璃

3、板上，把欲分析的样品加到薄层上，然后用合适的溶剂展开而达到分离、鉴别和定量的目的，因为层析是在薄层上进行，所以称它为薄层色谱法前景近年来，由于薄层扫描仪的出现以及高质量的预制板、高效薄层板的应用以及上样技术的改进。目前，薄层色谱已经进入仪器化、高效化、定量化及数据处理自动化阶段，即向仪器化薄层色谱发展。薄层色谱法作为一种敞开系统的色谱技术对分析工作者仍具有吸引力。尤其是对成分复杂的中药有着重要的意义。中国药典2005年版共收载了784个中药品种，其中就有1523项用于薄层鉴别项目，含量测定45项，从而说明了薄层色谱技术在中药鉴别方面的重要性

4、不足之处薄层色谱法在仪器自动化程度、分辨率及重现性等方面不如后来发展起来的气相色谱法和高效液相色谱法。第二节薄层色谱的基本技术原理薄层色谱法是色谱法中应用最普遍的方法之一，薄层色谱法按分离机制可分为吸附、分配、离子交换等方法。其中吸附色谱是最常用的层析方法，吸附色谱的原理是利用吸附剂对不同物质的吸附力大小，从而达到分离的目的。因此，当溶剂流过时，不同物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附，解吸附，再吸附，再解吸附。易被吸附的物质（吸附性强的物质），相对地移动慢一些，而较难吸附的物质相对地移动快一些。经过一段时间的展开，不同的物质就被彼此分

5、开，最后形成相互分离的斑点。【实验装置】前沿线色斑起始线图3-6薄层色谱示意图采用卡玛Nanomat 4手动点样仪，它操作简便，点样位置准确，不损伤薄层，结果优于传统手工点样。半自动点样仪全自动点样仪操作程序：一、制板二、点样三、展开四、显色薄层色谱法的操作及应用第三节影响薄层色谱分析的主要因素常规薄层色谱因为是一种“敞开系统”的色谱技术，与柱色谱的区别之一是除材料及器材以外，外界环境条件对被分离物质的层析行为影响很大，分离机制也很复杂；其次由于分析全过程是不连续的，所以操作技巧也明显的影响色谱质量；因而薄层色谱，尤其是常规薄层色谱，有被视

6、为是一种“难以驾驶”的技术。为了充分发挥薄层色谱技术在中药分析方面的优势，提高色谱的分离度和重现性，注意控制影响色谱质量的因素是非常重要的。以下所述的几个方面不仅对定量分析是必须注意的问题，对提高定性分析的质量也是不可忽视的。一、样品的预处理一般地将被检样品用合适的溶剂（常用甲醇、乙醇）提取，直接上样，即可达到分离，但未经处理的甲醇或乙醇提取液却经常由于杂志太多无法得到高质量的薄层色谱，尤其是复方中药制剂，样品的预处理是一个值得注意的步骤。例如：参苓白术散中的人参和甘草的薄层鉴别，用甲醇直接提取有两个扩斑点（黑红色）掩盖了人参很多斑点。甲醇

7、提取液用正丁醇处理后，糖点去除后，图谱好多了。再经上注后，则斑点分离更清晰了，可得到质量高的薄层色谱。样品供试液净化的方法通常有：1)单一溶剂萃取法：如浙贝母、平贝母、洋金花等均利用在碱性介质下用氯仿或苯将其所含的生物碱有选择地萃取出来，而舍弃其他成分，使供试液得以净化.2)分段萃取法：如龙胆泻肝丸先用正己烷萃取，供当归鉴别用；经用丙酮萃取，供用以鉴别马兜铃酸；最后用甲醇萃取再经氧化铝小柱用甲醇洗脱，以鉴别龙胆苦苷，是利用了各自不用的溶解度，用不同极性的溶剂分段萃取，从而达到样品供试液净化的目的3）液液萃取法：如小儿化毒散中牛黄的鉴别，先用

8、稀碱液将胆酸类成分溶出，用乙酸乙酯洗涤；再在酸性条件下，用醋酸乙酯萃取，以减少其他成分和杂质的干扰。4）固液萃取：将样品的提取液通过小柱（如：硅藻土柱）萃取，萃取液再经浓缩等处理