蛋白质化学》总复习课件.ppt

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1、《蛋白质化学》总复习课程内容第二章蛋白质的合成、转运、加工与修饰第三章蛋白质的结构与功能第四章蛋白质的分离纯化第五章蛋白质定性定量检测第六章蛋白质的生物信息学第七章蛋白质组学理论与进展第八章蛋白质芯片理论与进展第二章蛋白质的合成、转运、加工与修饰基本概念SD序列/核糖体结合位点（RBS）信号肽分子伴侣回答问题：1．蛋白质在生物体内合成时所涉及的几个重要元素是什么？它们的结构特征及其在蛋白质生物合成中的作用如何？2．原核生物中蛋白质合成过程分哪几个阶段？对每个阶段的过程描述；每个阶段所涉及的辅助因子及其功能？3.原核细胞与真核细胞的核糖体理化性质比较4．蛋白质在细胞内跨膜位移过程中所

2、涉及的重要元素有哪些？它们的结构特征及其在蛋白跨膜机制中的作用如何？（简述分泌性蛋白质跨膜移位的信号假说）5．蛋白质合成后一级结构上和高级结构上的修饰有哪些？理解分子伴侣的概念及其在蛋白折叠中的作用。（蛋白质合成后的加工与修饰）第二章主要内容1．蛋白质在生物体内合成时所涉及的几个重要元素2．原核生物中蛋白质合成过程3．蛋白质在细胞内跨膜位移过程4.蛋白质合成后的修饰1．蛋白质在生物体内合成时所涉及的几个重要元素（1）信使RNA（messengerRNA,mRNA）（2）遗传密码（3）核糖体（4）转运RNA（transferRNA,tRNA）（1）信使RNA（messengerRNA

3、,mRNA）SD序列/核糖体结合位点（RBS）：原核细胞mRNA的翻译起始密码子AUG的上游相距8～13个核苷酸处有一段由6～8个核苷酸组成的富含嘌呤的序列，以5’-AGGAGG-3’为核心，它与核糖体小亚基上的16S-rRNA的近3’末端处的一段短序列互补。（2）遗传密码三联体密码（tripletcode）/密码子（codon）：mRNA采用每三个相邻碱基编码一个氨基酸。61个密码分别代表各种氨基酸（aminoacid，aa）。一种aa少的只有1个密码（色氨酸和蛋氨酸），多的可有6个，但以2个和4个居多。终止密码子：UAA、UGA和UAG。起始密码子/蛋氨酸密码子：AUG（91％

4、）/GUG（8％）。遗传密码的特点：遗传密码的连续性、通用性、简并性、摆动性、不重叠性（3）核糖体核糖体上的4个活性部位：受位/A位：氨酰基位点。即接受氨酰-tRNA的部位。供位/P位：肽酰基位点。肽基-tRNA移交肽链后，tRNA被释放的部位。肽基转移酶/转肽酶位：肽链合成过程中催化形成肽键的酶活性部位。GTP酶位：可水解GTP，为催化肽基-tRNA由A位转到P位提供能量的酶活性部位。核糖体的存在形式：核糖体单体——无蛋白合成功能多聚核糖体：与mRNA结合——具有蛋白合成功能游离核糖体结合核糖体（与内质网膜结合）原核细胞与真核细胞的核糖体理化性质比较（见课件）（4）转运RNA（t

5、ransferRNA,tRNA）特点：分子量较小，沉降系数约为4S，约占细胞中RNA总含量的10～15％，在蛋白质合成时起搬运氨基酸的作用。它对不同的氨基酸有特异性，一种tRNA只能搬运一种氨基酸。与蛋白质合成有关的位点氨基酸（aa）结合位点反密码子位点识别aa-tRNA合成酶的位点。翻译过程中行使“起动”作用的tRNA：能特异地识别起始密码子AUG——蛋氨酰-tRNA（真核细胞）；甲酰蛋氨酰-tRNA（原核细胞或线粒体）氨酰-tRNA合成酶的专一性：对aa有极高的专一性，每种aa都有一个专一的酶。只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸。有的酶对aa的专一性并不很高，但对tRNA却

6、有极高的专一性。2．原核生物中蛋白质合成过程（1）起始过程（2）肽链延伸（3）肽链合成的终止与释放（4）原核生物中蛋白质合成过程所涉及的蛋白因子（1）起始过程①大小亚基分开（在IF-3作用下）；②mRNA与小亚基结合③形成30S起始复合物：在IF-2作用下，fMet-tRNAt与mRNA分子中的AUG相结合（在P位上），即密码子与反密码子配对，形成30S起始复合物）④大小亚基结合，形成有生物学功能的70S起始复合物。此时核糖体的Ｐ位被fMet-tRNA和ＡＵＧ占据；而A位则空着，有待于对应mRNA中第二个密码的相应氨基酰tRNA进入，从而进入延伸阶段。（2）肽链延伸①进位：Tu-G

7、TP与aa2-tRNA2结合成复合物；aa2-tRNA2与A位点上mRNA密码子结合；重新生成Tu-GTP。②肽键形成：在转肽酶作用下，形成肽键，成2肽；P位点上fMet与tRNA脱离；此时，P位空出。③移位：在移位酶(G)作用下，消耗1个GTP,核糖体沿mRNA5’→3’移动了1个密码子的距离.；A位上的肽酰-tRNA到P位，原来P位上无负载的tRNA离开核糖体。(此时核糖体的A位空着，有待于接受下一个aan-tRNAn)重复至肽链必需长度。（3）肽链合成的终止与释