实验十水中大肠菌群的含量测定课件.ppt

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1、实验十水中大肠菌群的测定（综合性实验）Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.沾根侧蛰煤惩稽剖萌鬼哀釉坊舔怀胯蛇蔷绒白猴站贯拣茸蔚幅彬歼侮吱炯实验十水中大肠菌群的含量测定6J2WyHg8413K3QzyJKdJ一、目的要求1．学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法。2．了解大肠菌群的检测作为饮水卫生指标的重要性。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slid

2、esfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.永掩扛杨肋撇底夹烛衡涟氢射佐拥炔萝丽毅侣往醒筐玩靖勋羞忆同综乎猿实验十水中大肠菌群的含量测定6J2WyHg8413K3QzyJKdJ二、基本原理多管发酵法包括初（步）发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。1．初（步）发酵试验发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基，并倒置一德汉氏小套管。乳糖能起选择作用，因为很多细菌不能发酵乳糖，而大肠菌群能发酵乳糖而产酸产气。为便于观察细菌的产酸情况，培养基内加有溴甲酚紫作为pH指示剂，

3、细菌产酸后，培养基即由原来的紫色变为黄色。溴甲酚紫还有抑制其他细菌如芽胞菌生长的作用。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.裁滔镀矢况治晶茧赘寝啃眷毋跺挽答摆拢捣躯亲迢棠踞胁漱己性蚌退棍呢实验十水中大肠菌群的含量测定6J2WyHg8413K3QzyJKdJ水样接种于发酵管内，37℃下培养，24小时内小套管中有气体形成，并且培养基混浊，颜色改变，说明水中存在大肠菌群，为阳性结果，但也

4、有个别其他类型的细菌在此条件下也可能产气；此外产酸不产气的也不能完全说明是阴性结果。在量少的情况下，也可能延迟到48小时后才产气，此时应视为可疑结果，因此，以上两种结果均需继续做下面两部分实验，才能确定是否是大肠菌群。48小时后仍不产气的为阴性结果。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.歇络燃舒粟岔纤撑酵栽但沛婿岸沫袜搏促在惨砒尖羹驮辛磋包骡其这荷乖实验十水中大肠菌群的含量测定6J

5、2WyHg8413K3QzyJKdJ2．平板分离平板培养基一般使用复红亚硫酸钠琼脂（远藤氏培养基，Endo＇smedium）或伊红美蓝琼脂（eosinmethyleneblueagar，EMBagar），前者含有碱性复红染料，在此作为指示剂，它可被培养基中的亚硫酸钠脱色，使培养基呈淡粉红色，大肠菌群发酵乳糖后产生的酸和乙醛即和复红反应，形成深红色复合物，使大肠菌群菌落变为带金属光泽的深红色。亚硫酸钠还可抑制其他杂菌的生长。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfil

6、e5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.幽吾轿洛琅俺巷撵短辣丙狮是背誓邯涕叙恭缚颐聚止枣樊澎哎镊提兵潞玻实验十水中大肠菌群的含量测定6J2WyHg8413K3QzyJKdJ伊红美蓝琼脂平板含有伊红与美蓝染料，在此亦作为指示剂，大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时，该两种染料即结合成复合物，使大肠菌群产生与远藤氏培养基上相似的、带核心的、有金属光泽的深紫色（龙胆紫的紫色）菌落。初发酵管24小时内产酸产气和48小时产酸产气的均需在以上平板上划线分离菌落。3．复发酵试验以上大肠菌群阳性菌落，经涂片染色为革兰氏阴性无

7、芽胞杆菌者，通过此试验再进一步证实。原理与初发酵试验相同，经24小时培养产酸又产气的，最后确定为大肠菌群阳性结果。Evaluationonly.CreatedwithAspose.Slidesfor.NET3.5ClientProfile5.2.0.0.Copyright2004-2011AsposePtyLtd.钓芒搬篇酣晦去磁慕紫宜厕呼翟被屹祭忙昔萄粕迄务歼禽蜡涸多扬苇脾颤实验十水中大肠菌群的含量测定6J2WyHg8413K3QzyJKdJ三、器材1、培养基乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管），三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管（瓶）（内有倒置小套管

8、），伊红美蓝琼脂平板，灭菌水；2、仪器或其他用具载玻片，灭菌带玻璃塞空瓶，灭菌吸管，灭菌试管等。Evaluationonly.CreatedwithAspose.S