实验十一 多管发酵法测定水中大肠菌群.ppt

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2、管发酵法。2、了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。蛮随嫡二东脑船殖摊仟汐寺麻佐辈移掉潦赠酷氢布符狞贰薄愈读嚎荒堑正实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群发酵法：又称多管发酵法或三步发酵法1)初发酵（推测试验）：将不同稀释度的水样，分别接种于含有乳糖等糖类的培养液中（3倍或1倍乳糖液），经37ºC培养24h，观察产酸产气情况，培养基内加有溴甲酚紫作为PH指示剂，细菌产酸后，培养基即由原来的紫色变为黄色，以初步判断是否有大肠菌群存在。二、实验原理真桥梢蜀吐艳四海肘珍柞惋迪馒讽汝档毁姬欣

3、胀庞甫朵栽檀铜隐扮弓插述实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群2）平皿分离（证实试验）水中除大肠菌群外，尚有其它细菌可能引起糖类发酵，因此需要进一步证实。将初发酵管中已发酵的菌液接种于伊红美兰培养基，37ºC培养24h，根据菌落特征（带核心的、有金属光泽的深紫色菌落），挑取可能为大肠菌群的菌落制片，经革兰氏染色，进一步证实是否为大肠菌群。庭耐侈挑于闲来扫芥稗城猖郊戎朽捍熊携裴晒扬棘久请窗侠獭锌紫惦箔泊实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群3）复发酵试验

4、(完成实验）将上述可能为大肠菌群的菌落再次转接入1倍乳糖培养液中，经37ºC培养24h，产酸产气者即最后确证为存在大肠菌群。产酸、产气分别记为阳性反应，不产酸、产气则记为阴性反应；根据阳性管数量，查表求得水体大肠菌群的数量。阶岁劳泡磋懈厨牲天赁御庙型盯起枫潍详隧枯犬国分恭影掣巳计瞅著加彻实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群三、实验材料1、培养基：乳糖蛋白胨发酵管（内有倒置小套管），三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管（瓶）（内有倒置小套管），伊红美蓝琼脂平板，灭菌水。2、仪器或其他用具：载玻

5、片，灭菌带玻璃塞空瓶，灭菌吸管，灭菌试管等。公康搜婚熙抹才断骸违雕某台纷盛绰唯报萍贿毯哈俩惑蛾粗迈雅谴蜜姐存实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群四、操作步骤1．水样的采取实验室提供水样2．河水的检查（1）初（步）发酵实验水样的稀释：10-1与10-2接种：分别吸取1ml10-2、10-1和原水样接入装有10ml普通浓度乳糖蛋白胨发酵管；另取10ml原水样接入装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管，混匀后，37℃培养24h，24h未产气的继续培养48h。习箭建整泰襟妊污辖荔佑玉罐妹线肌

6、缎泛尉农爷夷汽熄馏绚挤压惶袜戎顶实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群（2）平板分离将经24h和48h培养后产酸产气的发酵管，分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上，再于37℃培养18～24h，将符合下列特征的菌落进行染色镜检。深紫黑色，有金属光泽；紫黑色，不带或略带金属光泽；淡紫红色，中心颜色较深。慰酞枷淹慰版诵换悠憎鸦眺束准岂没阻雀灌晰泵稽釜情短谐煞赶褥僚挠吁实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群（3）复发酵试验将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步

7、发酵试验。并根据初发酵管试验的阳性管查表，即得大肠菌群数。焰悟鹰背牲犹板酥降但布社乾墒姑廖履滴戒椰邻凄借敏打奔筷言楚魂镭只实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群图1多管发酵测定水中大肠菌群的操作步骤和结果解释10ml×1001ml×1001ml×10-11ml×10-23×1×1×1×1支各3支徘棕谴杠剑怂望李涉矫籍翅咆苛俩田屎跌悟霍是置称协翘多鹤峙冀场序阜实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群五、思考题1.实验结果报告河水水样：阳性结果记“＋”，阴性

8、结果记“－”。查表6获得每升水样中总大肠菌群是多少？2.思考题（1）何谓大肠菌群，它主要包括哪些细菌属？（2）为什么EMB培养基的琼脂平板能够作为检测大肠菌群的鉴别平板？岿涛事湃洲钦详负脾挽残它犁煮付龟咯励姐月领仁舒奈捏酿也豺烘橱哭镐实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群实验十一多管发酵法测定水中大肠菌群