器官培养课件.ppt

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1、第3章器官培养大家好！植物组织培养学第3章器官培养本章主要内容根的培养茎尖的培养叶的培养第3章器官培养(1)一般掌握离体根培养的取材部位和培养基的选择；(2)掌握茎尖培养的种类和操作步骤；(3)掌握茎段培养中材料的选择、处理及培养基的调整；(4)掌握离体叶片的培养步骤；(5)一般掌握胚胎培养的类型与各自的注意事项。第3章器官培养本章教学目的与要求器官培养的定义：第3章器官培养研究器官的功能、分化、形态建成；快速繁殖；获得脱毒苗种质保藏等指植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等培养目的：第一节根的培养根培养的意义:1)是进行根系生理研究的最优

2、良实验体系;2)是研究器官分化、形态建成的良好体系；3）可建立快速生长的根无性系。第3章器官培养一、离体根的培养方法：1、培养无菌苗2、切取1.0cm的根尖3、接种在White培养基或1/2MS培养基中暗培养4、一周后，取侧根扩大培养，可得到离体根的无性系第一节根的培养二、培养基：无机离子较低的White培养基或者2/3或1/2的MS、B5培养基三、影响离体根生长的因素第一节根的培养5、环境条件4、pH3、生长物质2、培养基1、基因型影响因素第二节茎尖的培养一、含义及意义1、类型茎尖分生组织培养：对长度0.1mm左右，含1-2个叶原基的茎尖进行培养，目的是获得无病毒植株普通茎尖培

3、养：对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养，目的是快速繁殖。第二节茎尖的培养2、茎尖培养的意义无性系快速繁殖；培养无病毒苗，品种改良；理论基础研究。第二节茎尖的培养蝴蝶兰腋芽萌发二、茎尖培养的一般方法(一)制备外植体取1-2cm的枝条顶梢，去小叶---消毒---解剖镜下用解剖刀除去幼叶和叶原基，露出生长点，切下0.1-0.2mm长的茎尖(含1-2个叶原基)(二)培养基：一般为MS(三)培养方法：1、固体培养法：试管培养第二节茎尖的培养2、纸桥培养法含义：用酒杯状的滤纸代替琼脂，使杯底朝上塞入试管中，与液体培养基接触，将离体茎尖置于滤纸上方进行培养。优点：培养基是液体培养基

4、，营养物质能通过滤纸均衡而持久地供给外植体，有利于外植体的健康成长；缺点：操作工艺复杂。第二节茎尖的培养三、茎尖分生组织培养与脱毒见第八章植物脱毒技术四、普通茎尖培养与繁殖技术概念：快速繁殖(微繁殖):用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，繁殖出大量幼苗的繁殖方法。特点：繁殖速度快；使用材料少，生产效率高，省时省工；节约空间有利于工厂化生产；不受病虫害侵害。第二节茎尖的培养（一）茎尖微繁技术的过程：分5个阶段1、无菌培养体系的建立、2、芽的增殖3、中间繁殖体的增殖4、诱导生根5、试管苗的移植第二节茎尖的培养1、无菌培养体系的建立初代培养建立的无性繁殖系包括：茎梢、

5、芽丛、胚状体和原球茎等。外植体的制备培养基培养条件第二节茎尖的培养2、芽的增殖（1）顶芽和腋芽的发育顶芽、侧芽生长，形成一个微型的小灌木丛状的丛生苗结构。丛生苗的每个枝条转接继代，可迅速获得多数的嫩茎。这种繁殖方式称作微型扦插或无菌短枝扦插优点：不经愈伤组织，所以最能使无性系后代保持原品种的特性。第二节茎尖的培养图示茎段培养过程健康植株上选健壮的枝梢植株再生培养75%酒精1分钟1%次氯酸钠0.1%升汞去叶片用水冲洗茎段（2）不定芽的发育不定芽产生的途径：外植体上直接产生由外植体诱导的愈伤组织上产生。第二节茎尖的培养外植体脱分化愈伤组织再分化器官原基第二节茎尖的培养由第二阶段芽的

6、增殖产生的数量有限的芽、苗、原球茎称为中间繁殖体。将之转接到新鲜的相同培养基上进行继代培养，3-4周转接一次，扩大培养。3、中间繁殖体的增殖茎的培养发育方向腋芽萌发脱分化后产生胚状体（原球茎）脱分化后直接产生不定器官脱分化后形成愈伤组织第二节茎尖的培养4、壮苗和生根壮苗目的：使增殖的嫩枝生根产生小植株，以便移栽。第二节茎尖的培养用White、1/2或1/3MS、B5等生根培养基。降低N，P，K盐的量。适当加大生长素（如NAA），不用或少用细胞分裂素，或在无激素的培养基上生根。蔗糖降低到1.0-1.5%，以增强植株自养能力；加入1%左右的活性炭；增加光强度，以提高小植株的光合能力。

7、第二节茎尖的培养试管苗生根的措施(二)影响茎尖培养微繁殖的因素基因型外植体的大小供试植株的生理状态芽在植株上的部位供试植株的年龄培养基褐变玻璃化一、定义：离体叶的培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。第三节叶的培养第3章器官培养叶培养的意义：1、是研究叶形态建成、光合作用、叶绿素形成的好方法2、通过叶组织的脱分化与再分化以证实叶细胞的全能性3、通过叶组织培养，探索离体叶组织培养的条件和影响因素4、建立体细胞快速无性繁殖体系5、叶细胞培养物经诱变筛选突变体。