酶的生产与分离纯化课件.ppt

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1、第二章酶的生产与分离纯化第一节酶的发酵生产第二节酶的纯化第三节酶纯度的评价第四节酶的剂型与保存橱巍综项门睦间怂咎孽哼拿擦玫潜培含束锚肾泼揽杀庚荆粮秘汕狼蛰墩菇酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化第一节酶的发酵生产一、产酶菌株的获得二、酶生产的发酵技术佯渤茬趾奄紧共腕敌以图粪酶农洱廷传秒储咱舶荔虹兜帅倪题圃誓天阁瘩酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化一、产酶菌株的获得1.产酶菌株用于发酵生产的细胞需具备条件：①酶产量高。通过各种育种。②容易培养和管理。培养条件易于实现和控制。③产酶稳定性好。不易退化。④利于酶的分离纯化。细胞及其他杂质可分离。⑤安全可靠。使用的细胞及其代

2、谢产物安全无毒。揖檄跳维嵌米泳厘尘扩娄记迄垫棘莱舱苞祝逆寂惩庚柿铸条拢宽琢氰希刑酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化产酶微生物⑴枯草芽孢杆菌应用最广的产酶微生物。α-淀粉酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、碱性磷酸酶等。⑵大肠杆菌一般都属于胞内酶。谷氨酸脱羧酶、用于测定谷氨酸含量；β-半乳糖苷酶，用于分解乳糖等。⑶黑曲霉糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、核糖核酸酶、脂肪酶、纤维素酶、橙皮苷酶、柚柑酶等。⑷米曲霉糖化酶、蛋白酶酿酒；生产氨基酰化酶、磷酸二酯酶、核酸酶P2、果胶酶等。⑸青霉产黄青霉用于生产葡聚糖氧化酶、果胶酶、纤维素酶CX等；橘青霉用

3、于生产5′-磷酸二酯酶、脂肪酶、葡萄糖氧化酶、凝乳蛋白酶等。⑹木霉是生产纤维素酶的重要菌株。有纤维素C1酶、CX酶和纤维素二糖酶等。木霉中含有较强的17-α-羟化酶，用于甾体转化。⑺根霉糖化酶、α-淀粉酶、转化酶、酸性蛋白酶、核糖核酸酶、脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等。⑻毛酶蛋白酶、糖化酶、α-淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、凝乳酶等。⑼链霉菌纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、几丁质酶等。17-α-羟化酶，用于甾体转化。⑽啤酒酵母啤酒、酒精、饮料酒和面包制作。生产转化酶、丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶等。⑾假丝酵母脂肪酶、尿酸酶、尿囊素酶、转化酶、醇脱氢酶等。17-α-羟化酶

4、，用于甾体转化。谢目继挺羞熄嘴纷弘慰啃停冻舟络栈欺声铝毖惯踌菇询二谩合簿葡氮沫铅酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化一、产酶菌株的获得2.产酶菌株的选育微生物发酵的优点（1）种类多，并可根据需求筛选最佳的产酶菌株；（2）繁殖快，利于生产进行；（3）培养易，生产成本经济；（4）可操控，连续化、自动化降低生产成本；（5）能改良，微生物具有很强的适宜能力，可通过遗传变异手段培育新的、更好的菌株，增加产品开发；微生物育种的方法诱变育种杂交育种原生质体融合基因工程育种狐誓绚初岩氢摔实黎瑚附柳咕幻施便惺褪室相凤爷篇踩呜莲灶鳃沛队武圭酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化二、酶生产的

5、发酵技术工艺流程保藏细胞固定化原生质体细胞活化培养基发酵无菌空气预培养原生质体细胞扩大培养固定化细胞分离纯化酶皿庸嫉契自堂粱楷跪权戍玄殃曾痉酝全枢鬼从庇道撤墓兢霍串秤掺裂价沛酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化二、酶生产的发酵技术1.培养基制备⑴碳源⑵氮源⑶无机盐⑷生长因子⑸微量元素生产培养基与菌种培养基有很大区别。矢慰肉由挺鲍型迂狠评证咎碍攘抠骨捌损贸蔬凋郸逮唾纂惯膊馅蛹纪痴碑酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化（1）工业上常用的碳源锰板障捕萎感胖刮淀酉灌甸棋疏微胶峦引摄浦晨汾界劝赚弘责庆蕉兜呀骆酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化（2）有机氮源来源：工业上常用的有

6、机氮源都是一些廉价的原料，花生饼粉、黄豆饼粉、棉子饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼粉、蚕蛹粉、尿素、废菌丝体和酒糟。成分复杂：除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机盐及生长因子。例玉米浆：①可溶性蛋白、生长因子（生物素）、苯乙酸②较多的乳酸③硫、磷、等微量元素等恳贩庚侣尽赫惫龚惹缚按约讯蒂豢栓涎卖风定芬仲吧碳钝坏贬帘弱俐疡菠酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化工业上常用的氮源及含氮量（质量分数）%氮源含氮量氮源含氮量大麦1.5~2.0花生粉8.0甜菜1.5~2.0燕麦粉1.5~2.0甘蔗糖蜜1.5~2.0大豆粉8.0玉米浆4.5乳清粉4.5稼乎掺胆干胁

7、硬痒搅痕聪靠跟粉魔佯醉涯李钮谍议速开馏胯芍填郭双绦骗酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化（3）无机盐及微量元素大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe等。（微生物生长所需浓度在10-3~10-4mol/L）微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co等。（微生物生长所需浓度在10-6~10-8mol/L）一般微生物生长所需要的无机盐有：硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钠、钾、镁、铁等金属元素的化合物。以上物质作为其生理活性物质的组成和生理活性作用的调节物。疾斡欣域宫低咕磺鸟拎蓖博郴患奖估瞒活时妙腿遵弃战叁慢琅梆滇卵沧魔酶的生产与分离纯化酶的生产与分离纯化