临床常见病原体检查.ppt

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1、第九章临床病原体检测提纲第一节:标本的采集运送、实验室评价和检查方法第二节:病原体耐药性检测第三节:临床感染常见病原体检测第四节:病毒性肝炎检测第五节:性传播疾病病原体检测第六节:医院感染常见病原体检测病原体检测药敏检测教学目的与要求:了解掌握临床病原体检查的主要内容(标本采集、标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染)、检测原理以及临床实际应用的重要意义。重点与难点标本采集的原则及各种检查方法的适用范围及其优缺点药物敏感的常用试验方法及其特点耐药菌检测试验各种类型临床常见病原体的检查

2、甲、乙、丙型肝炎的检测方法各种性传播疾病病原体的检测方法、筛选试验、确诊试验及金标准院内感染定义提纲第一节:标本的采集运送、实验室评价和检查方法第二节:病原体耐药性检测第三节:临床感染常见病原体检测第四节:病毒性肝炎检测第五节:性传播疾病病原体检测第六节:医院感染常见病原体检测临床细菌学检验的特殊性依赖于细菌生长采集时间(发烧?)运送方式(密闭与否,保温与否?)感染的细菌种类及生长特征(苛养菌)病人是否使用抗生素(抗生素的影响)其他:消毒剂,白细胞吞噬等容易受环境中的细菌污染采集方法(无菌操作,避免污染)放置时间(及时运送,

3、避免细菌死亡)基本原则1:正确的标本类型和采集部位以反映有效病程2:采集和运送应无菌操作,避免污染3:尽快送检4:视所有标本为传染品,高度污染标本要有明显标识5:注意生物安全,标本用后要做消毒处理一、标本采集和运送(一)血液标本的采集适应症:疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人酒精棉球消毒,防止污染。静脉采血后,将血液注入培养瓶内。采集时间:一般在抗生素使用前,于发热初期或高峰期采血。采集频率:24小时内采血2~3次可提高阳性率,且在不同部位。采血量:血液与培养基的比例为1:5-10,一般成人血量5~10ml,婴儿1-5ml。

4、(二)尿液标本的采集首次晨尿,无菌采集中段尿10-20ml。排尿困难者考虑导尿采集标本。如考虑厌氧菌感染,采取膀胱穿刺法采集标本。(三)粪便标本采集自然排便者:挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。排便困难者:采用直肠拭子采集。怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻,立即接种或将标本置于碱性蛋白胨水或卡-布运送培养液送检。传染性腹泻应连续送检3次。(四)呼吸道标本采集类型:鼻咽拭、痰和经气管采集的标本。采集时间:晨痰,且在取痰前用清水反复漱口。方法:(1)自然咳痰法:(2)气管镜下采集法;(3)气管穿刺法。WBC≥25/lp,上皮≤10

5、/lp。上呼吸道存在正常菌群,在采集标本与结果分析时应予考虑。(五)脑脊液与其它无菌体液采集临床医生采用腰椎穿刺,抽取2-3ml,置于无菌容器中立即送检,不得保存于冰箱中。脑膜炎的主要病原体:脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌。(六)眼、耳标本采集(七)泌尿生殖道标本采集性传播性疾病取尿道口分泌物、外阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物和前列腺液等。生殖道疱疹常穿刺抽取疱疹液。盆腔脓肿患者则于直肠子宫凹陷处穿刺取脓液。所有标本收集后于4℃保存直至培养(八)创伤、组织和脓肿标本损伤范畴较大的创伤,从不同部位采集多份标本

6、.清除污物,以碘酒、酒精消毒皮肤.开放性脓肿:无菌棉拭子采集脓液及病灶深部分泌物。封闭性脓肿:无菌干燥注射器抽取。疑为厌氧菌感染,取脓液后立即排净注射器内空气,针头插入无菌橡皮塞送检。标本送检标本要求尽快送检,否则影响阳性率。烈性传染病标本需专人护送。二、标本的实验室质量评估标准1.标本必须注明姓名、年龄、性别、采集日期、临床诊断、检验项目等基本信自。2.仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本,一般情况下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。而病毒检测的标本可于4℃存放2~3天。3.检查送检容器是否完整,

7、有无破损或渗漏等情况,若有则不予接收。4.标本储存、运送方式不当,不予接收。5.明显被污染的标本不予接收。6.标本量明显不足的标本,不予接收。7.同一天申请做同一实验的重复送检标本(血培养除外),不予接收。8.对于烈性传染病标本的采集和运送应严格执行相关规定,要有完善的防护措施,按规定包裹及冷藏,附有详细的采样及送检纪录,由专人护送。标本是否合格,以保证检测结果的准确性!三、检查方法(一)直接显微镜检查(二)病原体特异性抗原检查(三)病原体核酸检查(四)病原体的分离培养和鉴定(五)血清学试验(一)直接显微镜检查——不染色标本

8、不染色标本:适用于检查生活状态下病原体的动力及运动状况。方法:压滴法、悬滴法。意义:在不染色状态下借助暗视野显微镜或相差显微镜观察病原菌的动力、活动方式。部分病原体可借此初步诊断,如梅毒螺旋体。(一)直接显微镜检查——染色标本染色标本目的:了解细菌的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体。方法

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