K专题3-1-菊花的组织培养.ppt

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1、专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养（一）植物组织培养的基本过程一基础知识原理：植物细胞的全能性离体的植物器官、组织、细胞愈伤组织脱分化根芽再分化植物体例1：下列关于愈伤组织叙述错误的是A.愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.愈伤组织的细胞具有全能性C.愈伤组织是由排列紧密的薄壁细胞组成D.愈伤组织可形成具有生根发芽能力的胚状结构①脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。脱分化（去分化）、愈伤组织、再分化：C②愈伤组织的特点：排列疏松无规则、高度液泡化、细胞壁薄等①脱

2、分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。脱分化（去分化）、愈伤组织、再分化：③再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，重新分化成根或芽的过程。细胞分化、脱分化（去分化）、再分化三者的关系未分化的细胞分化(高度)分化的细胞脱分化(相对)未分化的细胞(高度)分化的细胞再分化例2：下列叙述错误的是A.细胞的分化在一定条件下是可逆的B.细胞分化的本质是DNA分子结构发生了改变C.细胞分化是指细胞的形态、结构和功能发生稳定性改变的过程D.细胞分化发生在生物体的整个生命进程中B（二）影响植物

3、组织培养的因素1.外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同如：菊花未开花植株的茎上部新萌生的侧枝2.培养基的配制（MS培养基）大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Mo、Cu、I有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素等3.不同植物激素使用顺序、用量和比例P33使用顺序实验结果先使用生长素利于细胞分裂，但不分化先使用细胞分裂素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高生长素/细胞分裂素比例高：利于根的分化

4、、抑制芽的形成。比例低：利于芽的分化、抑制根的形成。4.消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境5.pH、温度、光照菊花：pH=5.8温度控制在18~22℃每日光照12h二实验操作视频录象二实验操作制备MS固体培养基外植体消毒外植体消毒：流水冲洗—洗衣粉刷洗—流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上二实验操作制备MS固体培养基外植体消毒接种培养移栽栽培外植体消毒：流水冲洗—洗衣粉刷洗—流水冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上思考在整个操作过程中，是如何实现无菌

5、环境的？1.培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2.外植体的消毒（酒精、氯化汞）3.接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）4.无菌箱中的培养5.移栽到消过毒的环境中生存一段时间例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：1）过程①是把花药分离出来，在无菌条件下放在人工培养基上进行离体培养，该培养基中加入的物质应该有____________。（至少答三种）答案：大量元素、微量元素、有机物（氨基酸、蔗糖、维生素等）、水、植物激素等例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：2）过程②是花药在培养基所提供的特定条件下发生多次

6、细胞分裂，形成愈伤组织，此过程叫作________，细胞分裂的方式是__________。脱分化有丝分裂例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：3）过程③是诱导愈伤组织分化出芽和根，最后长成植株。这一过程叫_____。该植株是_____植株，其特点是______，生产上没有应用价值。植株弱小,高度不育再分化单倍体例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：4）若图中提供花药的植株基因型为AaBb，则经过①~⑤处理后的植物中，可稳定遗传的个体占______。100%例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：5）花

7、药离体培养应用的是_____________技术其理论基础是___________。例3：根据单倍体育种大致过程回答问题：5）花药离体培养应用的是_____________技术其理论基础是___________。答案：植物组织培养细胞的全能性