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《微生物发酵生产谷氨酰胺转氨酶的研究进展_王齐.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·732·齐齐哈尔医学院学报2013年第34卷第5期JournalofQiqiharUniversityofMedicine,2013,Vol.34,No.5·综述·讲座·微生物发酵生产谷氨酰胺转氨酶的研究进展王齐宋小平王雅洁蔡晶晶李光伟【摘要】谷氨酰胺转氨酶(TG)是一种催化酰基转移反应的转移酶,它可使蛋白分子间和分子内产生共价交联,从而改变蛋白的功能特性,在食品工业具有重要的潜在应用价值。为了实现工业化生产TG目的,文中综述了近年来国内外在谷氨酰胺转氨酶菌株的选育、发酵条件的优化和分离提纯等方面的进展情况。【关键词】谷氨酰胺转氨酶;菌株的选育;
2、发酵条件的优化;分离提纯LatestadvanceofresearchontransglutaminasesmadebymicrobialfermentationWANGQi,etal.DepartmentofBiochemistry,AnhuiMedicalCollege,Hefei,Anhui230601,China.【Abstract】Transglutaminase(TG),theenzymecatalyzingthereactionoftheacyltransfer,generatesinter-andintramolecularcova
3、lentcrosslinkingbetweenproteinssoastochangethefunctionalcharacteristicsoftheprotein,thereforetheenzymehaveimportantpotentialapplicationsinthefoodindustry.InordertoachievethepurposeofindustrialproductionofTG,thepapercoversthelatestadvanceinthefermentationconditionsoptimizationo
4、fTGStrainandtheseparationandpurificationoftheenzyme.【Keywords】Transglutaminase;Strainscreening;Fermentationconditionoptimization;Purification谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase,简称TG,EC2,3,2,要。王璋、王灼维等根据产酶微生物自身特性和酶催化反应13),是一种催化酰基转移反应的转移酶。由于其具有在蛋结果的特征性质,首先设计了一个从土壤中筛选TG生产菌[1]白质间架桥形成ε-(γ-Glu)
5、-Lys的异型肽键,将蛋白质共株的技术路线,有针对性地采集各种典型土样,利用廉价的酶价交联聚合,使蛋白质改性,该酶已经在食品工业、医药工业、作用底物开展蛋白质交联凝絮一沉淀性能测定试验方法来作分析检测和生物工程等方面取得广泛应用,因而具有很大的为初筛手段,获得了一系列生产MTG的微生物菌株。进而对[1-3]研究开发空间。其进行了分类鉴定,定名为链霉菌(streptomycessp.)WZFF.近年,国内外关于TG在食品工业应用的报道较多,[5]W-12等,酶活为0.24U/ml。接着,他们对菌株WZFF.W-[2]ClauciaF等报道在亚马逊河附
6、近筛选到一株产谷氨酰胺12的孢子进行亚硝基胍(NTG)单独和结合经胺复合进行了转氨酶的菌BL32,经TG处理的酪蛋白、大豆分离蛋白和水解多次诱变,再经初筛分析和复筛验证,获得了一系列产酶性能动物蛋白的自由氨基减少,并对酪蛋白显示出明显的蛋白质良好、遗传形状稳定的TG高产突变株,最高的酶活相对提高[3]交联作用,与MartinP等研究TG对酪蛋白的蛋白质交联了近7.96倍[6]。为了进一步提高TG生产菌株的总体性能,[4]作用结论一致。姜燕等以大豆分离蛋白、酪蛋白酸钠等蛋王璋等[5-6]将常规诱变方法选育出的菌株以孢子悬液组、白质为原料制备蛋白膜,研
7、究了TG对各种蛋白膜的溶解特PDA培养斜面组、无机盐斜面培养组和NTG诱变组等四种方性和体外消化率的影响,发现TG的作用不仅使大豆分离蛋式送上了“神舟”四号无人船进行空间搭载诱变育种。研究白膜、酪蛋白酸钠膜和乳清蛋白浓缩物膜的水分含量和总可结果表明,6株搭载突变株的酶生产能力比对照提高了40%。溶性物质量明显降低,而且显著降低了蛋白膜的消化率。鉴二、微生物谷氨酰胺转氨酶发酵条件的优化于该酶在食品工业的广泛应用,本文简要综述国内外微生物工业化规模生产TG,除筛选产酶活力高的菌株外,研究发酵法生产TG的研究进展。菌株产酶的最佳培养基和环境条件也是非常重
8、要的。一、产谷氨酰胺转氨酶菌株的选育1.营养条件对微生物谷氨酰胺转氨酶发酵过程的影响:在微生物发酵生产TG的开发中,获得优
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