达科为IL-2 ELISA试剂盒说明书.pdf

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1、产品信息和操作指南MouseIL-2预包被ELISAkitCat#:DKW12-2020-048/DKW12-2020-096本试剂盒专用于科研，而非用于诊断MouseIL-2DKW12-2020目录产品简介……………………………………………………………1知识背景……………………………………………………………1试剂盒提供的试剂…………………………………………………2需要实验者自行准备的试剂与仪器………………………………2注意事项……………………………………………………………3试剂的配制…………………………………………………………5

2、操作过程……………………………………………………………7结果分析……………………………………………………………9试剂盒的保存………………………………………………………9操作步骤一览表……………………………………………………10参考文献……………………………………………………………11ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法……………………12预包被ELISA试剂盒系列产品…………………………………151、产品简介：®达优小鼠IL-2ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，定量检测细胞培养上清液和小鼠血清、血浆和其他体液中天然和重

3、组IL-2的浓度。本试剂盒为预包被板，“夹心一步”完成，整个过程孵育时间不超过2.5小时，洗涤8次，操作时间大大减少。本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系，E-mail：RD@dakewe.com.检测范围：500-7.8pg/mL灵敏度：3pg/mL重复性：板内、板间变异系数均＜10％。2、知识背景：白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）主要由有丝分裂原或抗原活化的T淋巴细胞分泌，是一种多效细胞因子（1，2）。它在抗原特异的T细胞的克

4、隆扩增中起着关键的作用。研究表明，它介导了多种细胞类型的多种免疫反应。-1-3、试剂盒提供的试剂：试剂规格配制Cytokinestandard2/1瓶*干粉状，按瓶上说明操作1：100用DilutionbufferR（1×）Biotinylatedantibody2/1瓶*稀释1：100用DilutionbufferR（1×）Streptavidin-HRP2/1瓶*稀释DilutionbufferR（1×）3/2瓶*即用型Washingbuffer（50×）1瓶1∶50用蒸馏水稀释TMB1瓶即用型Stopsolution1瓶即用

5、型8×12或PrecoatedELISAplate即用型8×6*封板膜2/1张*即用型说明书1份*：96/48Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P10003．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器6．37℃温箱-2-5、注意事项：1.试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。实验前室温平衡对Washingbuffer（50×）、DilutionbufferR（1×）、PrecoatedELI

6、SAplate和TMB有重要意义。2.冻干标准品冰上操作，按照标签说明溶解干粉，充分混匀，按照一次使用量分装，-20℃贮存，避免反复冻融。3.预包被板条使用前，请恢复到室温后再打开外包装袋，实验中不用的板条立即放回包装中，密闭封口，4℃可保存1个月。其余不用试剂应包装好或盖好。4.Washingbuffer（50×）在4℃保存可能有结晶析出，使用前务必使结晶完全溶解后（如加热、平衡温度后混匀等）再配置成Washingbuffer（1×）工作液。5.HRP和检测抗体体积量很小，使用前请高速短暂离心管子，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底

7、。6.实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。7.使用前检查试剂盒内各种试剂；试剂稀释、加样和中止反应充分混匀或者摇匀对实验结果尤为重要，最好使用低速频率振荡器或者反应过程中每15分钟手工摇匀一次。8.实验板孔加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应孔的孵育时间一致。9.使用洁净的塑料容器盛装洗涤液。-3-10.洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，滤纸上看不到水印。勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。11.TMB对光敏感，避免长时间暴露于光下，避免金属接触影响结果。有毒，避免用手接触！准备使用的TMB若变为蓝色，表明TMB

8、已经污染，请丢弃。请在终止反应后10分钟内读取OD值。12.请严格按照说明书标明的时间和温度进行孵育。冬季室内温度偏低，请使用恒温箱或培养箱孵育为好。13.试剂盒在保质期内使用，且不同批号试剂不要混用。14.500pg/mL以上的结果为非线性的，根