组培苗褐化现象最有可能的原因和防止措施.doc

《组培苗褐化现象最有可能的原因和防止措施.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、组培苗褐化现象最有可能的原因和防止措施褐变又称褐化，是指培养材料向培养基释放褐色物质，致使培养基逐渐褐变，培养材料也随之变褐甚至死亡的现象。其机理是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞内的酚类化合物聚合成暗黑色的大分子物质。培养材料褐化所产生的醌类物质当扩散到培养基后，会抑制其他酶的活性，导致代谢功能紊乱，从而影响离体材料的培养。引起褐变的条件是：O2、酶、底物，缺一不可。酶主要是多酚氧化酶，底物主要是醌类化合物。1引起褐变的原因1.1植物的种类和基因型不同植物、同种的不同类型、同种的不同品种的植物发生褐变的

2、程度，都具有很大的差异，这取决于植物体内含有的酚类物质多少以及酚氧化酶活性的强弱。1.2外植体的类型和生理状态由于植物体内酚类化合物含量和多酚氧化酶活性在不同季节不相同，一般在生长季节含有较多的酚类化合物，所以一般在早春或秋季取材。通俗的说长的久又老的部位含酚类物质要多，所以一般选取幼龄嫩茎部位作为外植体。1.3外植体的大小和消毒时间部分实验证明，外植体材料越小越容易发生褐变，同样各种化学消毒剂消毒时间过长也会加重褐变现象，特别是酒精，时间不宜过长。还有外植体的切口大小也会影响褐变，切口宜小不宜大。1.4光照和温度

3、光照会提高多酚氧化酶的活性，从而促使培养物的褐变。故在初代培养中，对外植体进行暗光培养，对抑制褐变发生有一定的效果。同时，高温能促进酚类物质的氧化；低温能抑制酚类物质的合成，降低多酚氧化酶的活性，从而减轻褐变。所以，如有褐变情况的发生，可适当降低培养温度，以及遮光或暗光培养一段时间。1.5培养基成分无机盐以及细胞分裂素浓度过高也会影响褐变。2克服褐变现象的措施2.1 有产生褐变的原因可知，选择适宜的外植体以及最佳培养条件，可从根本上减少褐变的概率。2.2 连续转移。对于容易褐变的材料可间隔2-24小时培养后，再转瓶

4、，这样联系处理7-10天后，褐变现象会得到控制或大为减轻。2.3 使用抗氧化剂。在培养基中加入抗坏血酸（50-100mg/L）、或柠檬酸（150mg/L）等抗氧化剂能够较有效的避免或减轻褐变现象。2.4 添加吸附剂。添加0.1%-0.5%的活性炭等吸附剂，对防止褐变也有较明显的效果。但是活性炭等吸附剂在吸附有毒物质的同时，也会吸附其他营养物质，所以使用活性炭要注意实验对比。