结核分枝杆菌药敏试验结果的判读.pdf

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1、结核分枝杆菌药敏试验结果的判读国家结核病临床实验室1结核病耐药问题提高了临床对DST的需求TDRXDRAlmostallIncrthedrugseasingTreMndDRMDRPlusQuinoloneandAminoglyocsideDRINHandRIFAnyoneormoreOtherthanMDR/XDR2药物敏感性试验的方法一、表型药敏试验ü固体培养基药敏试验：绝对浓度法;比例法ü液体培养基药敏试验：MGIT960;BacT/ALERT3D；üMIC测定：药敏板法二、分子药敏试验ü基

2、因测序ü间接基因测序法:线性探针杂交技术；基因芯片；GeneXpert；HRM3药敏试验结果的不一致问题1.同一份患者不同时间留取的标本结果不一致2.同一份患者不同的方法间结果不一致4比例法和绝对浓度法的选择5绝对浓度法与比例法的差别差异比例法绝对浓度法接种菌量10-4mg和10-6mg10-3mg培养基药物浓度IHN：0.2μg/mlIHN：1，10μg/mlSM：4.0μg/mlSM：10，100μg/mlRFP：40μg/mlRFP：50，250μg/mlEMB：2.0μg/mlEMB：5

3、，50μg/mlKM:30μg/mlKM:30μg/mlOFLX:3μg/mlOFLX:3μg/ml报告结果时间4-6周4周6绝对浓度法和比例法药敏试验出现结果差异用两种药敏试验方法测定了360株结核分枝杆菌对H、R、S、E的药敏性,两种方法的符合率：H81.1%R92.5%S83.6%E98.6%比例法诊断耐药的比例高于绝对浓度法对两种方法不符合的菌株的MIC测定显示：这些菌株对相应药物的MIC值都接近临界值。刘宇红.中华结核和呼吸杂志.20007耐药诊断临界值的确定:(1)能够最大限度的区分

4、临床上可能的敏感株和可能的耐药株；(2)这个浓度应该是血和组织浓度可以达到的；(3)当以这个浓度诊断细菌学耐药时，可能会出现临床反应性降低。8可能敏感株和可能耐药株的MIC分布情况s（1）inatrsfoycnClinicallyClinicallyeususceptibleresistantqestrains(PS)strains(PR)rFBreakPointMICMinimalinhibitoryconcentrations(MIC)9可能敏感株和可能耐药株的MIC分布情况sina（2）t

5、rsfoycneuClinicallyClinicallyqersusceptibleresistantFstrains(PS)BreakpointMICstrains(PR)Minimalinhibitoryconcentrations(MIC)10可能敏感株和可能耐药株的MIC分布情况sina（3）trsfoy?BreakcnPointeuMICqerPSPRFMinimalinhibitoryconcentrations(MIC)11不同药物的表型药敏试验结果的可靠性差异较大一般认为，以固

6、体培养基为基础的DST，诊断利福平和异烟肼耐药的准确性最高，链霉素和乙胺丁醇次之，而一些临界浓度与药物最低抑菌浓度(MIC)接近，或是临床疗效不显著的药物（如二线抗结核药物）的药敏试验结果需要慎重解读。12表型药敏试验V.S.V.S.13固体罗氏培养基法与液体培养基法DST的比较不同方法药物种类价格从培养到获得DST（ＲＭＢ）结果罗氏培养基多种（除PZA外）15元/药2-3个月液体培养基多种（包括PZA）>100元/药2-4周14微孔板法药敏试验板式药敏试验的技术特点：1.包含的药物种类较多，包

7、括是包括了一些新型的抗结核药物，如莫西沙星，克拉霉素，阿莫西林/克拉维酸钾、氯法齐明。2.获得耐药浓度，发现中度敏感/低度耐药菌株。3.缩短报告结果时间。一般2周，特殊情况下3周报告结果。4.提高了标准化程度。药敏培养板的制备实现了标准化，结果的读取依赖专业设备，有利于质量控制。以固体药敏试验为对照评估板式药敏试验结果70人份对照药物符合率统计总数/符合数/符合率备注（微孔板对罗氏）份份TCH7070100%--PNB7070100%--SM706897.10%2人份敏感对耐药（长到第二孔）：1

8、8012、17076INH706998.60%17993（0.8浓度敏感对1浓度敏感）EMB706897.10%2人份敏感对耐药17999、18044RFP706998.60%1人份敏感对耐药18026(NTM)RFT7070100%--LFX7010份是中敏对耐药17076、17081、17082、17085、18013、18014、18026、18043、18049、5781.40%18051，3份是敏感对耐药18002、18015、18050AM706796%3人份中敏对敏感18012、1