非发酵菌群的分类鉴定.ppt

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1、非发酵菌群的分类鉴定第一节非发酵菌概述非发酵菌（Nonfermenters）是指一大类不能以发酵方式（或不能以明显发酵方式）分解葡萄糖的革兰氏阴性无芽孢的需氧或兼性厌氧杆菌。它们在分类学上分别隶属于不同的科、属，但生理生化特性又很相似，故在临床微生物学检验中，常把它们当作同一类菌群来对待。非发酵菌大多是条件致病菌，可引起各种感染，尤其是医源性感染，近年来各国发病率逐年上升，已成为当前医院管理中的一个重要问题。非发酵菌的种类很多，包括十几个菌属、几十个种，有些还有生物型、亚型等。但与医学关系密切的、具有临床意义的有：假单胞菌属、寡

2、氧单胞菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、鲍特氏菌属、金氏杆菌属、不动杆菌属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土壤杆菌属、军团菌属。但在临床上用一般方法不能够分离出来的细菌有：鲍特氏菌属（百日咳鲍特氏菌）：初次分离对营养要求较高，在血琼脂平板和巧克力琼脂平板上均不能生长，必须在含有血液、甘油、马铃薯以及活性炭的包-金（Bordet-Gengou,B-G）二氏培养基上才能生长。故用一般的培养基不可能将其分离出来。军团菌属营养要求苛刻，普通培养基、血平板和巧克力平板均不生长；生长过程中需要多种微量元素如：铁、钙、镁、锰、锌、钼等作为酶的

3、协同因子；同时需要甲硫氨酸、半胱氨酸等特殊氨基酸才能生长。目前公认的最适宜培养基是缓冲活性炭酵母浸出液，加上铁、L-半胱氨酸和α-酮戊二酸组成的BCYEa（bufferedcharcoal–yeastextractagar）培养基。因此在临床上真正能分离出来且有临床意义的非发酵菌群有：假单胞菌属、寡氧单胞菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、鲍特氏菌属（百日咳鲍特氏菌除外）、金氏杆菌属、不动杆菌属、无色杆菌属、莫拉氏菌属、艾肯氏菌属、土壤杆菌属。第二节非发酵菌群的初步识别第三节、非发酵菌群的属间鉴别（一）、氧化酶阴性菌群的属间鉴别（二）

4、、氧化酶阳性菌群的属间鉴别第四节、非发酵菌群的属内鉴别一、假单胞菌属和寡氧单胞菌属假单胞菌属属假单胞菌科，该属为严格的专性需氧的革兰氏阴性杆菌，具有一端鞭毛，无荚膜、无芽孢。该菌属在自然界中分布广泛，营养要求不高，氧化酶试验均为阳性，是假单胞菌科的代表菌属。假单胞菌科由假单胞菌属及其亲缘关系密切的菌属（以前大部分属于假单胞菌属）组成。用于假单胞菌科分类的方案有两个：其一：根据细菌的表型特征分为七个主要的组，即：产荧光组、斯氏族、产碱组、食酸组、类鼻疽组、敏捷—德氏组、缺陷组。其二：根据rRNA—DNA同源性将假单胞菌科分为5

5、个rRNA同源群，即：rRNA同源群Ⅰ—包括铜绿假单胞菌等12个种；rRNA同源群Ⅱ—包括伯克霍尔德菌属等7个种；rRNA同源群Ⅲ—包括食酸丛毛单胞菌等7个种；rRNA同源群Ⅳ—微小假单胞菌等8个种；rRNA同源群Ⅴ—寡氧单胞菌等64个种。此外，还有4个种属于rRNA同源群未知的假单胞菌。上述分类中，不管采用哪种分类，临床上常见的只有两个种，即假单胞菌属的铜绿假单胞菌和寡氧单胞菌属的嗜麦芽寡氧单胞菌。1、假单胞菌属该菌属的代表种为铜绿假单胞菌。该菌早在1872年由施罗顿（Schroeten）首先命名，因其在代谢过程中能产生水溶性

6、兰绿色色素，在感染部位能形成兰绿色脓液，故称绿脓杆菌。该菌除分布在水源、土壤、空气中外，亦存在于正常人的皮肤、呼吸道、肠道中，是非发酵菌群中最常见的条件致病菌。铜绿假单胞菌鉴别要点：（1）、铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上能产生水溶性绿色素，使整个培养基变为绿色。（2）、在血平板上经35—37℃，18—24h培养可表现为：菌落灰绿色、半透明、大而扁平、表面湿润、边缘不齐；有金属光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。（3）、该菌为专性需氧菌，氧化酶和触酶均阳性；O/F试验“O型”；无芽孢、无荚膜，菌体一端有单鞭毛

7、，运动活泼。2、寡氧单胞菌属该菌属原属于假单胞菌属，在1961年根据其鞭毛特征被命名为嗜麦芽假单胞菌；1983年根据核酸同源性和细胞脂肪酸组成等归入黄单胞菌属，命名为嗜麦芽黄单胞菌；但由于其无黄单胞菌素、无植物病原性，能在37℃生长等与其它黄单胞菌不同，故在1993年又被命名为嗜麦芽寡氧单胞菌。该菌的生长特性、营养要求、及其它生物学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所不同的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌属相区别的重要特性；此外，该菌一端具有3根以上丛鞭毛，运动活泼，可与氧化酶阴性的不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。3、鼻疽（类鼻疽）伯

8、克霍尔德菌鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderiamallei）和类鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderiapseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌，属假单胞菌属rRNA同源群的第二群；2000年被NCCLS/CLSI（NationalCommitt