脑脊液常规操作规程.ppt

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1、脑脊液常规操作规程河大一附院检验科常规检测内容包括：一般性状的检查、潘迪氏试验、白细胞计数与分类、革兰氏染色、抗酸染色、墨汁负染色。一般性状检查主要观察颜色（无色、白色、红色、黄色、绿色、黑色等），透明度（透明、微浑、浑浊、脓样等），凝块（无、有或薄膜形成、胶冻状）。1、红色：如标本为均匀红色血性脑脊液，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应：(1)将血性脑脊液试管离心5min(1500r／min)，如上层液体呈淡红色或黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，呈黄色说明出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，

2、多为穿刺损伤所致的新鲜出血。(2)红细胞在渗透压较血浆高的脑脊液中5min后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。常见颜色变化及临床意义2、黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。3、脓样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎，应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌。4、绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。5、褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。蛋白定性试验(潘迪氏法)实

3、验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。所需试剂：5%的苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，置37℃温箱内1～2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。试验方法：取潘（迪）氏试剂2～3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液1～2滴，衬以黑背景，立即观察结果。结果判断：阴性：清晰透明，不显雾状；极弱阳性（±）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到；弱阳性（+）：灰白色云雾状；阳性（2+）：白色浑浊；强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀；最强阳性（4+）：白色凝块。白细胞总数非血性标

4、本：于小试管内滴入1%冰醋酸1-2滴，转动试管，使壁内沾有冰醋酸后倾去，滴入标本3-4滴，数分钟后充入计数池计数，计数10个大方格内的白细胞数。白细胞数/L=10个大方格内的白细胞数×106。如白细胞较多，可计数一大格内的细胞×10×106。血性标本用1%的冰醋酸稀释后计数，并用以下公式校正：每升中白细胞数=每升中白细胞末校正数-每升中红细胞数×每升血液中白细胞数/每升血液中红细胞数。（EDTA-K2抗凝？）（上机？）成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范围：成人：(0-8)×106/L；儿童为（0-15）×106/L，

5、新生儿为（0-30）×106/L。如白细胞达（10-50）×106/L为轻度增加，（50-100）×106/L为中度增加，200×106/L以上显著增加。如超过300×106/L时外观可变为浑浊。白细胞分类1、直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。2、染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l滴，推

6、片制成均匀薄膜，置室温或37℃温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。正常脑脊液中白细胞主要为单个核细胞，多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为7：3，偶见内皮细胞：软脑膜和蛛网膜细胞、室管膜细胞、脉络膜细胞等。正常脑脊液单个核细胞：约95%，多型核细胞：约5%。红细胞总数1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红细胞数，其总和即为每μl的细胞数。2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释液0.38m1的

7、小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每μl脑脊液的细胞总数。