实验六+霉菌形态观察.ppt

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1、实验六霉菌的小培养和形态观察1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2．了解四类常见霉菌的基本形态一、实验目的二、实验原理霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形的丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于

2、载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。三、实验材料1．菌种：黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯琼脂平板培养物。2．培养基：土豆琼脂或察氏琼脂乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等3．仪器或其他用具：平皿，盖玻片，U形玻棒，解剖刀，20%的甘油以及显微镜等。霉菌小培养四、实验步骤1、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放

3、一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于121℃灭菌30min，烘干备用。2、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂（或察氏琼脂）培养基6-7ml注入另一块灭菌平皿中，使之凝固成薄层。用解剖刀切成0.5-1cm2的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每块放两片）。注意无菌操作3、接种：用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块的边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。4、培养：现在平皿的滤纸上加3-5ml灭

4、菌到20%的甘油（保持湿度），盖上平皿，28℃培养。5、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜观察。a.观察黑根霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊）：根霉假根孢囊孢子（sporangiospore）b.观察毛霉菌丝情况和孢子情况（着重辨认孢囊梗、孢子囊）：c.观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认足细胞、分生孢子梗和分生孢子）：黑曲霉足细胞d.观察青霉菌丝分隔和分生孢子着生情况（着重辨认帚状分支的分生孢子梗）：青霉菌落特征：霉菌的菌落大、疏

5、松、干燥、不透明，多呈绒毛状、絮状或网状等，菌体可沿培养基表面蔓延生长，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色。五、实验结果绘四种霉菌的形态特征：黄曲霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），有足细胞，顶囊，分生孢子梗青霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），为帚状分生孢子穗，初级小梗，次级小梗；黑根霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢囊梗，匍匐枝和假根；毛霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢囊梗六、思考题1、你主要根据哪些形态特征来区分上述四种霉菌？P46，（1）2、

6、你认为在显微镜下，细菌，放线菌，酵母菌和霉菌的主要区别是什么？P46，（2）1.镜检时，你如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝？P42，2（3）镜检时，基内菌丝色暗，分枝较少，而气生菌丝色深，分枝多且向上分化出孢子丝。上次实验习题解答请确保镜头擦拭干净！